方法名稱:清熱解毒口服液-梔子甙的測(cè)定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:該方法采用高效液相色譜法測(cè)定清熱解毒口服液中梔子甙的含量。
該方法適用于清熱解毒口服液中梔子甙的含量測(cè)定。
方法原理:供試品蒸干后,用丙酮溶解,濾過,續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處檢測(cè)梔子甙的吸收值,計(jì)算出其含量
試劑:1.乙腈(色譜醇)
2.二次重蒸水
3.丙酮(色譜醇)
4.磷酸
5.乙醇
儀器設(shè)備:1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱:十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。
1.3 紫外吸收檢測(cè)器
2 色譜條件
2.1 流動(dòng)相:水 乙腈(45:5);流速:1.0ml/min。
2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):240nm
2.3 溫度:室溫。
3 超聲波發(fā)生器
試樣制備:1. 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取梔子甙對(duì)照品2mg,置100ml量瓶中,加丙酮 水((1:1)溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品溶液。
2. 供試品溶液的制備
精密量取清熱解毒口服液10m1于蒸發(fā)皿中,置水浴上蒸干,加丙酮溶解,后轉(zhuǎn)入100m1量瓶中,加丙酮至刻度,放入超聲發(fā)生器中振蕩25min( 40℃ ),然后,以0.5μm的濾膜過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
操作步驟:分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處測(cè)定梔子甙的吸收值,計(jì)算出其含量。
參考文獻(xiàn):中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,反相高效液相色譜法測(cè)定清熱解毒口服液中梔子甙含量,2000,6(5),p13。