時間分辨熒光免疫測定基本原理
時間分辨熒光免疫測定基本原理是什么?為了幫助檢驗職稱考生了解,助力檢驗職稱考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:
1.時間分辨
正常組織在激發(fā)光照射下可以發(fā)出一定波長的熒光,但該熒光壽命較短(1~10ns),而鑭系元素螯合物的熒光壽命較長(10~1000μs)。故待短壽命背景熒光完全衰變后再測定鑭系元素離子螯合物的特異性熒光信號。
2.Stokes位移
激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的波長差,如果Stokes位移小,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜常有重疊,相互干擾,影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。鑭系元素位移大。
3.發(fā)射光譜和激發(fā)光譜
鑭系元素發(fā)射光譜帶較窄,多在613nm±1Onm。利用濾光片只允許此波段的熒光通過,避免干擾。
4.熒光標(biāo)記物的相對比活性
比活性是指單位時間內(nèi)每個標(biāo)記分子可被探測到的信號量。
5.信號增強
Eu3+標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物在弱堿性溶液中被激發(fā)后的熒光信號較弱,加入一種酸性增強液可使Eu3+從復(fù)合物上完全解離下來,并與另一種螯合劑所螯合,以增強熒光信號。
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