
用品及準(zhǔn)備
小試管數(shù)支,平板(玻板、白磁磚)、離心機(jī)、顯微鏡、生理鹽水、玻棒、記號(hào)筆等;經(jīng)鑒定合格的兩套試劑血清,每套有抗"A"、"抗B"、"抗A,B"三種試劑血清和已知血型的A、B、O三種紅細(xì)胞。
方法及內(nèi)容
1.試管法
①檢查前整理檢驗(yàn)臺(tái),試管架上只放待檢者血樣本,查對標(biāo)簽。
②取6支試管(10mm×75mm),3支用于正向定型,分別注明抗A、抗B、抗AB;另外3支用于反向定型,分別注明A細(xì)胞、B細(xì)胞和O細(xì)胞。
?、壅蚨ㄐ驮嚬苤蟹謩e加入相應(yīng)試劑血清2滴,再加待檢者5%紅細(xì)胞懸液2滴,混勻,置室溫5min.
?、芊聪蚨ㄐ驮嚬苤蟹謩e加待檢者血清2滴,再加相應(yīng)的5%紅細(xì)胞懸液2滴,混勻,置室溫5min.
?、輰?支試管以3000r/min離心15s。
?、奕〕鲈嚬茌p輕擺動(dòng),先肉眼觀察紅細(xì)胞有無凝集,再用顯微鏡觀察結(jié)果。判讀結(jié)果見下表。
試劑血清、紅細(xì)胞血型鑒定
正向定型 | 反向定型 | 待檢查 血 型 | ||||||
抗A | 抗B | 抗A,B | A細(xì)胞 | B細(xì)胞 | O細(xì)胞 | |||
- | - | - | + | + | - | O | ||
+ | - | + | - | + | - | A | ||
- | + | + | + | - | - | B | ||
+ | + | + | - | - | - | AB |
⑦再次核對后填寫登記本及報(bào)告單或輸入計(jì)算機(jī)。
2.平板法
?、贊崈舻钠桨澹ò状糯u或玻板等)用記號(hào)筆劃出反應(yīng)小格,在正向定型一側(cè)注明抗A、抗B、抗A,B,反向定型一側(cè)小格中注明A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞。
?、谠谡蚨ㄐ鸵粋?cè)小格中先加入相應(yīng)試劑血清1滴,再加入待檢者5%紅細(xì)胞懸液l滴;在反向定型一側(cè)先加入待檢者血清1滴,再加入相應(yīng)5%試劑紅細(xì)胞1滴。
?、蹞u動(dòng)平板數(shù)次,3~5min后觀察凝集現(xiàn)象,再以顯微鏡觀察,15min報(bào)告結(jié)果。如有懷疑者,須做試管法對照。
注意事項(xiàng)
1.操作者必須認(rèn)真細(xì)致,嚴(yán)格查對,準(zhǔn)確報(bào)告血型結(jié)果。
2.鑒定血型時(shí),室內(nèi)溫度宜在20~24℃,以免產(chǎn)生假陽性??梢捎欣淠瘯r(shí),必須放置37℃水浴箱中加溫,加溫時(shí)間酌情而定。
3.抗A、抗B、抗A,B試劑血清,效價(jià)不低于64,親和力在15s以內(nèi)出現(xiàn)凝集,3min時(shí)凝塊不小于1mm3,冷凝集素效價(jià)在4以下。
4.應(yīng)另備有一套合格的試劑血清作對照。
5.所有待檢者的血型均應(yīng)做正、反向定型,防止誤定血型。