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血液分析儀主要用以檢測各種血細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類和血紅蛋白含量。檢測原理包括電學(xué)和光學(xué)2大原理。電學(xué)原理包括電阻抗法和射頻電導(dǎo)法;光學(xué)檢測原理包括激光散射法和分光光度法。
一、血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理
1.電阻抗法原理:血細(xì)胞為不良導(dǎo)體,用等滲電解質(zhì)溶液稀釋的血細(xì)胞懸液通過兩側(cè)有穩(wěn)定電流的小孔時(shí),由于細(xì)胞導(dǎo)電性質(zhì)較電解質(zhì)溶液低,小孔感應(yīng)區(qū)內(nèi)電阻增加,瞬間引起電壓變化產(chǎn)生一個(gè)脈沖信號,即通過脈沖。脈沖信號經(jīng)過放大、甄別、整形后,送入計(jì)數(shù)系統(tǒng),而得到細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。根據(jù)脈沖大小還可分析細(xì)胞體積,提供細(xì)胞體積分布圖形。
2.流式細(xì)胞術(shù)與光散射血細(xì)胞檢測原理:利用流式細(xì)胞術(shù),單個(gè)細(xì)胞隨著流體動(dòng)力聚集的鞘流液通過激光照射的檢測區(qū)時(shí),使光束發(fā)生折射、衍射和散射,散射光由光檢測器接收后產(chǎn)生脈沖、脈沖大小與被照細(xì)胞的大小成正比,脈沖的數(shù)量代表細(xì)胞的數(shù)量。
二、白細(xì)胞分類原理
1.白細(xì)胞三分類原理:根據(jù)電阻抗法原理,不同體積的白細(xì)胞通過小孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖大小有明顯差異,儀器根據(jù)脈沖的大小將白細(xì)胞進(jìn)行分群。標(biāo)本中加入溶血?jiǎng)?,將紅細(xì)胞溶解,儀器將從白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中測量得到的大于35fl電子脈沖的數(shù)量作為白細(xì)胞計(jì)數(shù)。同時(shí)根據(jù)脈沖的大小將血內(nèi)白細(xì)胞分為三群:小細(xì)胞群(35~90fl,主要為淋巴細(xì)胞)、中間細(xì)胞群(91~160fl,包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及幼稚細(xì)胞等)和大細(xì)胞群(161~450fl,以中性粒細(xì)胞為主)。
其特點(diǎn)是檢測速度快,操作簡便,可大大提高工作效率。此類儀器可用于常規(guī)檢查標(biāo)本白細(xì)胞分類的篩選,對儀器檢測出的陽性標(biāo)本應(yīng)該進(jìn)一步做顯微鏡檢查。如有懷疑血液病的病人,即便儀器沒提示異常,也應(yīng)作血涂片,顯微鏡檢查。
2.五分類原理:由電阻抗法的三分群發(fā)展為多項(xiàng)技術(shù)(激光、射頻及化學(xué)染色)聯(lián)合同時(shí)檢測一個(gè)細(xì)胞,綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),得出白細(xì)胞五分類結(jié)果。此法測定細(xì)胞多,特異性強(qiáng),現(xiàn)在認(rèn)為是較理想的自動(dòng)化血細(xì)胞分類法。
三、血紅蛋白測定原理
三分群或五分類血液分析儀均用分光光度法測定血紅蛋白。其原理是含溶血?jiǎng)┑南♂屢菏辜t細(xì)胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血?jiǎng)┲心承┏煞纸Y(jié)合,形成一種穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物,在特定的光波范圍(530~550nm)下進(jìn)行比色,因吸光度的變化與血液血紅蛋白濃度成正比,從而計(jì)算出血紅蛋白濃度。
【例題】白細(xì)胞三分類計(jì)數(shù)的方法是
A.電阻抗法
B.激光散射法
C.射頻電導(dǎo)法
D.分光光度法
【答案】A.
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