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霍亂化學(xué)檢驗(yàn)方法介紹

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霍亂化學(xué)檢驗(yàn)方法介紹:

(一)血液檢查

紅細(xì)胞和血紅蛋白增高,白細(xì)胞計(jì)數(shù)10~20×109/L(1萬(wàn)~2萬(wàn)/mm3)或更高,中性粒細(xì)胞及大單核細(xì)胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽降低,血pH下降,尿素氮增加。治療前由于細(xì)胞內(nèi)鉀離子外移,血清鉀可在正常范圍內(nèi),當(dāng)酸中毒糾正后,鉀離子移入細(xì)胞內(nèi)而出現(xiàn)低鉀血癥。

(二)尿檢查

少數(shù)病人尿中可有蛋白、紅白細(xì)胞及管型。

(三)病原菌檢查

1.常規(guī)鏡檢

可見(jiàn)粘液和少許紅、白細(xì)胞。

2.涂片染色

取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢,可見(jiàn)革蘭陰性稍彎曲的弧菌。

3.懸滴檢查

將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢,可見(jiàn)運(yùn)動(dòng)活潑呈穿梭狀的弧菌。醫(yī)學(xué)|教育|網(wǎng)搜集整理

4.制動(dòng)試驗(yàn)

取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時(shí)左右的表層生長(zhǎng)物,先作暗視野顯微鏡檢,觀察動(dòng)力。如有穿梭樣運(yùn)動(dòng)物時(shí),則加入01群多價(jià)血清一滴,若是群霍亂弧菌,由于抗原抗體作用,則凝集成塊,弧菌運(yùn)動(dòng)即停止。如加01群血清后,不能制止運(yùn)動(dòng),應(yīng)再用0139血清重作試驗(yàn)。

5.增菌培養(yǎng)

所有懷疑霍亂患者糞便,除作顯微鏡檢外,均應(yīng)作增菌培養(yǎng)。糞便留取應(yīng)在使用抗菌藥物之前,且應(yīng)盡快送到實(shí)驗(yàn)室作培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水,36~37℃培養(yǎng)6~8小時(shí)后表面能形成菌膜。此時(shí)應(yīng)進(jìn)一步作分離培養(yǎng),并進(jìn)行動(dòng)力觀察和制動(dòng)試驗(yàn),這將有助于提高檢出率和早期診斷。

6.分離培養(yǎng)

常用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基,36~37℃培養(yǎng)8~10小時(shí)霍亂弧菌即可長(zhǎng)成小菌落。后者則需培養(yǎng)10~20小時(shí)。選擇可疑或典型菌落,應(yīng)用霍亂弧菌“0”抗原的抗血清作玻片凝集試驗(yàn),若陽(yáng)性即可出報(bào)告。近年來(lái)國(guó)外亦有應(yīng)用霍亂毒素基因的DNA探針,作菌落雜交,可迅速鑒定出產(chǎn)毒01群霍亂弧菌。

7.PCR檢測(cè)

新近國(guó)外應(yīng)用PCR技術(shù)來(lái)快速診斷霍亂。其中通過(guò)識(shí)別PCR產(chǎn)物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因(TcpA)來(lái)區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來(lái)區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時(shí)內(nèi)可獲結(jié)果,據(jù)稱能檢出每ml堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。

8.鑒別試驗(yàn)

古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑒別。

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直播時(shí)間:1月28日

直播內(nèi)容:2021公衛(wèi)醫(yī)師摸底測(cè)試

針對(duì)人群:所有人群

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