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中性粒細(xì)胞吞噬和殺菌功能的檢測(cè)

2014-02-18 16:03 來(lái)源:
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檢測(cè)原則是將受檢細(xì)胞懸液按一定比例混和,繼加活的白色念珠菌懸液,保溫生,加美藍(lán)溶液作活體染色,取樣涂片鏡檢。如胞內(nèi)白色念珠菌呈藍(lán)色,表示該菌已被殺死,共計(jì)100200個(gè)細(xì)胞,分別求其吞噬率和殺菌率。

溶細(xì)胞法更能直接反映細(xì)胞殺菌的情況,將受檢的細(xì)胞懸液與一定量已經(jīng)新鮮人血清調(diào)理過(guò)的大腸桿菌或金黃色葡萄球菌懸液混合后,置37℃,每隔一定時(shí)間取定量培養(yǎng)物,稀釋后接種固體平板培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)18h后,計(jì)算菌落數(shù),據(jù)以計(jì)算中性粒細(xì)胞的殺菌能力。

正常情況下,對(duì)大腸桿菌的殺菌率約為90%,對(duì)金黃色葡萄球菌的殺菌率約為85%.

在臨床常用的硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原試驗(yàn),本法用以檢測(cè)中性粒細(xì)胞的胞內(nèi)殺菌能力,由于中性粒細(xì)胞在殺菌過(guò)程中能量消耗劇增,耗氧量亦隨之相應(yīng)增加,磷酸己糖旁路代謝活力增強(qiáng),葡萄糖6-磷酸氧化脫氫,此時(shí)加入NBT可接受所脫的氫,使原先呈淡黃包的NBT還原成點(diǎn)狀或塊狀甲朊顆粒并沉積在胞漿內(nèi)。

近此年來(lái)還采用了新穎的化學(xué)發(fā)光法,中性粒細(xì)胞在吞噬經(jīng)調(diào)理的金黃色葡萄球菌過(guò)程中,伴有化學(xué)發(fā)光的產(chǎn)生,故可用化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定中性粒細(xì)胞的吞噬功能及其代謝活性。實(shí)驗(yàn)證明全血化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)可同時(shí)獲得兩種信息,即中性粒細(xì)胞的吞噬功能、代謝活性及受檢血清的調(diào)理功能。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理由于中性粒細(xì)胞的氧代謝活性與對(duì)細(xì)胞的吞噬率密切相關(guān),殺菌能力與發(fā)光強(qiáng)度相平行,因此化學(xué)發(fā)光法可檢測(cè)細(xì)胞殺菌功能。因此吞噬細(xì)胞化學(xué)發(fā)光測(cè)定法可用以研究中性粒細(xì)胞的吞噬功能,代謝活性和血清調(diào)理功能,它可在生理溫度和中性環(huán)境下測(cè)定,能較好地反映生理?xiàng)l件下吞噬細(xì)胞的功能,具有準(zhǔn)確靈敏、樣品用量少,簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn)。其敏感性高于NBT還原試驗(yàn)。

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