檢驗(yàn)士:《答疑周刊》2019年第22期:
《臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)》重要考點(diǎn)(二)
1.熒光免疫技術(shù)常用的熒光色素:
①異硫氰酸熒光素,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。②四乙基羅丹明,呈橘紅色熒光。③四甲基異硫氰酸羅丹明,呈橙紅色熒光。④藻紅蛋白,呈明亮的橙色熒光。
2.時間分辨熒光免疫測定中多用Eu3+和Tb3+為標(biāo)記物,其中Eu3+最為常用。
3.辣根過氧化物酶(HRP)是目前在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中應(yīng)用最廣泛的標(biāo)記用酶。
4.鄰苯二胺(OPD)被認(rèn)為是HRP最為敏感的色原底物之一。
5.四甲基聯(lián)苯胺(TMB):TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。已成為目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。
6.吖啶酯是目前常用的直接標(biāo)記發(fā)光劑。
7.辣根過氧化物酶催化的發(fā)光劑為魯米諾及其衍生物,堿性磷酸酶催化的發(fā)光底物為AMPPD。
8.每個親和素能結(jié)合4個分子的生物素,二者之間的親和力極強(qiáng)。
9.免疫組化最常用的制片方法有冷凍和石蠟切片。首選的制片方法是冷凍切片。
10.外周血單個核細(xì)胞的分離:Ficoll分離液可作為常規(guī)的淋巴細(xì)胞分離液,主要用于分離外周血中單個核細(xì)胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層、單個核細(xì)胞層、粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。
11.T細(xì)胞表面標(biāo)志:CD3+CD4+CD8-輔助性T細(xì)胞;CD3+CD4-CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞;CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。
12.T細(xì)胞表面主要的CD抗原:
①CD2表達(dá)于全部人T細(xì)胞和NK細(xì)胞表面,因其能與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合,又稱為綿羊紅細(xì)胞受體。
②CD3是一種多鏈的糖蛋白,表達(dá)于全部T細(xì)胞表面,是T細(xì)胞的表面標(biāo)志,是TCR-CD3復(fù)合物的重要組成部分。
③CD4/CD8:CD4和CD8分子分別表達(dá)于外周血不同的T細(xì)胞亞群表面,是區(qū)分T細(xì)胞亞群的重要標(biāo)志。表達(dá)CD4的主要是輔助性T細(xì)胞,表達(dá)CD8的主要是細(xì)胞毒性T細(xì)胞。
13.膜免疫球蛋白(mIg)又稱為BCR,表達(dá)于所有成熟的B細(xì)胞和大多數(shù)B細(xì)胞瘤的細(xì)胞表面,屬于免疫球蛋白超家族原型,是B細(xì)胞最具特性的表面標(biāo)志。
14.NK細(xì)胞的表面標(biāo)志:目前NK標(biāo)志以CD3-、CD16+、CD56+為公認(rèn)。
15.T細(xì)胞功能檢測:T細(xì)胞增殖試驗(yàn)、T細(xì)胞分泌功能測定、T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)(特異性抗原皮膚試驗(yàn)和PHA皮膚試驗(yàn))。
16.B細(xì)胞功能檢測:B細(xì)胞增殖試驗(yàn)和溶血空斑試驗(yàn)。
17.溶血空斑試驗(yàn):每一個空斑中央含一個抗體形成細(xì)胞,空斑數(shù)目即為抗體形成細(xì)胞數(shù)。空斑大小表示抗體形成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。
18.中性粒細(xì)胞功能檢測:趨化功能檢測、吞噬和殺菌功能測定(NBT還原試驗(yàn))。
19.巨噬細(xì)胞功能檢測:炭粒廓清試驗(yàn)、吞噬功能檢測、巨噬細(xì)胞溶酶體酶的測定、細(xì)胞毒作用測定和巨噬細(xì)胞促凝血活性測定。
20.前向散射光(FS):信號的強(qiáng)弱與細(xì)胞的體積成正比,因此可以說FS是用于檢測細(xì)胞或其他粒子物體的表面屬性。
21.側(cè)向散射光(SS):SS信號的強(qiáng)弱與細(xì)胞或其他顆粒形狀及粒度成正比。SS用于檢測細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性,可獲得有關(guān)細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的參數(shù)。
22.正常人尿液中Ig含量甚微。在濾過膜損傷輕微時,尿液中以IgG濾出增多為主,當(dāng)濾過膜損傷嚴(yán)重時,尿液中除IgG濾出外,分子量較大的IgM也開始濾出。
23.免疫固定電泳是臨床鑒定M蛋白最常用的方法。
24.正常血清中補(bǔ)體各組分含量相差較大,其中C3含量最高。
25.HBsAg為乙肝患者血清中首先出現(xiàn)的病毒標(biāo)志物。
26.抗-HBs是一種保護(hù)性抗體,是機(jī)體感染或接種乙肝疫苗的標(biāo)志。
27.HBeAg陽性是乙肝傳染性的標(biāo)志,在急性乙型肝炎早期常有HBeAg的檢出。
28.超敏反應(yīng)的分型:Ⅰ型超敏反應(yīng),即速發(fā)型超敏反應(yīng);Ⅱ型超敏反應(yīng),即細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng);Ⅲ型超敏反應(yīng),即免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng);IV型超敏反應(yīng),即遲發(fā)型超敏反應(yīng)。
29.Ⅰ型超敏反應(yīng)的主要特征有:①超敏反應(yīng)發(fā)生快,消退快;②常引起生理功能紊亂,較少發(fā)生嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷;③由特異性IgE型抗體介導(dǎo),無補(bǔ)體參與;④具有明顯的個體差異和遺傳背景。
30.常見Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾?。孩偎幬镞^敏性休克(青霉素引發(fā)的過敏性休克最為常見);②血清過敏性休克;③呼吸道過敏反應(yīng);④消化道過敏反應(yīng);⑤皮膚過敏反應(yīng)(可由藥物、食物、油漆、腸道寄生蟲或冷熱刺激等引起。病變以皮疹為主,特點(diǎn)是劇烈瘙癢。)
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