SPA酶聯免疫吸附試驗的注意事項：

1.目前使用的聚苯乙烯塑料板對抗體的吸附性能較好，因此對于抗原，特別是大分子（分子量＞100萬）的抗原應該進行一些適當的處理，如DNA，應將其事先凍融，使其變成較小分子再包被，如脂蛋白則應改變包被的溫度，可在37℃包被過夜醫(yī)`學教育網搜集整理。

2.由于SPA－ELISA的敏感性極高，因此也很容易出現非特異性顯色，排除非特異性顯色的方法除了純化抗原抗體外，還應該注意：

（1）抗原包被后，再以牛血清白蛋白包被一次或稀釋液中加入1%的牛血清白蛋白均可，以占據未包被的一些空隙。

（2）檢測血清抗體時，需事先檢測大標本量的正常血清效價水平，在檢測待檢標本時，減去正常的血清效價。

（3）ELISA法加入標記物后往往37℃孵育2h，SPA同IgG的結合不是免疫反應，而是一種化學反應，一般認為，這種結合可能在極短的時間內發(fā)生，所以加PPA后，孵育時間可以縮短到0.5h.孵育過久，反而可因為SPA本身吸附到反應板上，造成非特異性顯色。

3.疊氮鈉對SPA顯色影響較大，所以在SPA-ELISA過程中，不宜加疊氮鈉做防腐劑，在組織細胞培養(yǎng)固定，也不適宜用甲醛固定，而需采取甲醇或乙醇。