方法名稱：

三七片－人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定三七片中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。

本方法適用于中成藥三七片。

方法原理：

本品加甲醇加熱回流，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)203nm處檢測(cè)人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 乙腈

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按三七皂苷R1峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B

時(shí)間（分鐘）

流動(dòng)相A（%）

流動(dòng)相B（%）

0~12

19

81

12~60

19→36

81→64

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，取約0.8g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品和三七皂苷R1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rg10.4mg、人參皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，取約0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，放置過(guò)夜，置80℃水浴上加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)203nm處測(cè)定人參皂苷Rb3（C53H90O22）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p323。