方法名稱(chēng)： 哈西奈德溶液—哈西奈德的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定哈西奈德溶液中哈西奈德的含量。

本方法適用哈西奈德溶液。

方法原理： 將供試品加入內(nèi)標(biāo)溶液，經(jīng)超聲溶解后制成流動(dòng)相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)238nm處檢測(cè)哈西奈德（C24H32ClFO5）和內(nèi)標(biāo)黃體酮的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1.甲醇

2.乙醚

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按哈西奈德峰計(jì)算應(yīng)不低于 2500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 水 乙醚= 76 24 4

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱(chēng)取供試品

精密量取本品適量，加甲醇制成每1mL中含有0.1mg的溶液。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取哈西奈德對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL中含有0.1mg的溶液，精密量取該溶液10mL與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取黃體酮適量，加流動(dòng)相制成每1mL中含有0.15mg的溶液，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

精密量取上述供試品溶液10mL與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液的續(xù)濾液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)238nm處測(cè)定哈西奈德和內(nèi)標(biāo)黃體酮的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算哈西奈德的含量，即得。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p394。