方法名稱：

乙酰螺旋霉素原料藥—乙酰螺旋霉素的測(cè)定—抗生素微生物檢定法

應(yīng)用范圍：

該方法采用抗生素微生物檢定法測(cè)定乙酰螺旋霉素原料藥中乙酰螺旋霉素的含量。

該方法適用于乙酰螺旋霉素原料藥。

方法原理：

供試品經(jīng)乙醇溶解后，加滅菌水制成每1mL約含1000單位的溶液，按抗生素微生物檢定法測(cè)定。

試劑：

1. 乙醇

2. 滅菌水

3. 枯草芽孢桿菌懸液

4. 培養(yǎng)基Ⅱ

儀器設(shè)備：

試樣制備：

1.枯草芽孢桿菌懸液

取枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63 501]的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于盛有營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在35~37培養(yǎng)7日，用革蘭染色法涂片鏡檢，應(yīng)有芽孢85%以上。用滅菌水將芽孢洗下，在65℃加熱30分鐘，備用。

2.培養(yǎng)基Ⅱ

混合胨6g，牛肉浸出粉1.5g，酵母浸出粉6g及水1000mL，調(diào)節(jié)pH使比最終pH略高0.2~0.4，加入瓊脂15~20g，加熱溶化后濾過(guò)，加葡萄糖1g溶解后，搖勻，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為8.0~8.2，在115℃滅菌30分鐘。

3.供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加乙醇使溶解（每5mg加乙醇2mL），加滅菌水制成每1mL約含1000單位的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求

操作步驟：

取供試品溶液照抗生素微生物檢定法測(cè)定。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.6。