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人類免疫缺陷病毒檢測方法

2012-08-02 14:40 醫(yī)學教育網(wǎng)
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檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法,操作方便,易于普及應用,其中抗體檢測尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測定,在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。

抗體檢測

主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光試驗(IFA)。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細胞液提取物作抗原,IFA用感染細胞涂片作抗原進行抗體檢測,如果發(fā)現(xiàn)陽性標本應重復一次。為防止假陽性,可做Western blotting (WB,蛋白印跡法)進一步確證。

WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進行分離,再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉(zhuǎn)移于硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶標抗體染色,就能測出針對不同結(jié)構(gòu)蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。

HIV抗體檢測結(jié)果有兩種可能,HIV陽性或HIV陰性。

HIV陰性 說明從人體內(nèi)檢測不到HIV抗體,陰性符號以(-)表示。不能說沒有感染HIV, 要看是什么時候檢測的,在窗口期內(nèi),感染者的體內(nèi)還沒有產(chǎn)生HIV抗體,或還沒有產(chǎn)生足量的HIV抗體,這時HIV檢測是陰性結(jié)果,如果在窗口期之后檢測的,可以排除感染HIV的可能。

HIV陽性 說明從人體內(nèi)檢測到了HIV抗體,陽性符號以(+)表示。

檢測結(jié)果不定因素 感染還處于窗口期:從HIV進入體內(nèi)到檢測這段時間還不夠長,因此血清還沒有形成典型的抗體反應

艾滋病進展到終末期,抗體水平下降

其他非病毒蛋白抗體的交叉反應:自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下,身體可以產(chǎn)生一些抗體,其反應與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應很相似

抗原檢測

用ELISA檢測P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時,血中就有該抗原存在。由于P24量太少,陽性率通常較低?,F(xiàn)有用解離免疫復合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。

核酸檢測

用PCR法檢測HIV基因,具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點,目前該法已被應用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。

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