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中藥之分離純化法

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將中藥的提取液經(jīng)濃縮(或不濃縮)后,較長時間放置,就可析出沉淀,再經(jīng)重結(jié)晶可得單體成分,這是個別現(xiàn)象,如從槐米中提取蘆丁。如果要得到更多的成分,或者要系統(tǒng)地研究一味中藥中的化學(xué)成分,則需經(jīng)過比較復(fù)雜的過程,一般是經(jīng)過初步分離純化,得到某一類型的總成分(混合物),或者得到極性相近的一混合物,再經(jīng)過進(jìn)一步分離得到單體成分。分離方法有很多種醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

系統(tǒng)溶劑分離法

較常用的作法是將中藥乙醇或甲醇提取液適當(dāng)濃縮后,與某種擔(dān)體(如硅藻土、硅膠等)混合均勻,干燥后,用極性不同的溶劑,極性由小到大分別提取。

然后再選擇方法進(jìn)行分離。也可以將藥材粗粉直接用極性不同的溶劑分別提取,得各個部分。

兩相溶劑萃取法

萃取法是利用混合物中各成分在互不混溶的溶劑中分配系數(shù)不同而分離的方法。可將被分離物溶于水中,用與水不混溶的有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取,也可將被分離物溶在與水不混溶的有機(jī)溶劑中,用適當(dāng)pH的水液進(jìn)行萃取,達(dá)到分離的目的。

簡單萃取法

在中藥成分的系統(tǒng)研究中,常采用的方法是將中藥水提取液適當(dāng)濃縮,或?qū)⒅兴幰掖?(甲醇)提取液適當(dāng)濃縮,回收醇后,加入適量水,用極性不同的與水不混溶的有機(jī)溶劑,極性由小到大,如選用石油醚(或己烷)、氯仿(或乙醚)、醋酸乙酯、正丁醇,分別進(jìn)行萃取,分別回收溶劑得到極性不同的萃取物。在某些情況下也可只選1~2種溶劑進(jìn)行萃取。

分離堿性成分(生物堿)或酸性成分,可調(diào)節(jié)溶液的pH值后再進(jìn)行萃取是常用的方法。

pH梯度萃取法

此法是分離生物堿類成分、酸性及酚性成分的一種方法。是利用被分離成分的堿性或酸性不同而采用的方法。

連續(xù)萃取法

為克服使用分液漏斗多次萃取的操作麻煩,可采用連續(xù)萃取器。這一儀器利用兩溶劑的比重不同,自然分層和分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時發(fā)生傳質(zhì)。選擇連續(xù)萃取法時,需視所用溶劑的比重大于或小于被提取的水溶液比重的情況,而采用不同式樣的儀器。

液滴逆流分配法

此法需特殊的儀器,多用于極性較大的成分的分離,關(guān)鍵是選擇好固定相和流動相。

沉淀法

此法是將被分離物溶于某種溶劑中,再加入另外一種溶劑或試劑,使某種或某些成分析出沉淀,而某些成分保留在溶液中經(jīng)過濾后達(dá)到分離的一種方法??梢允闺s質(zhì)沉淀析出,也可使欲得成分沉淀析出。

制藥中較常用的方法是中藥的水提取液濃縮到一定程度后,加入濃乙醇使含醇量達(dá)到一定濃度,使一些成分析出沉淀,通常為50~80%,具體含醇量視欲得到的成分的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)而定。此法通常稱為“水煮醇沉法”。用此法可除去或得到多糖類等成分。

鉛鹽法曾被應(yīng)用于分離具有酸性和中性的成分,目前已較少用。

在中性醋酸鉛沉淀部分可得到含羧基及鄰二酚羥基的成分,如有機(jī)酸、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)、某些黃酮等。堿式醋酸鉛沉淀部分得到只有一個酚羥基的成分以及中性皂苷等。經(jīng)堿或醋酸鉛沉淀后的水或醇液中有中性成分。因鉛對人有害,生產(chǎn)中最好不用此法。

根據(jù)被分離成分結(jié)構(gòu)選用某些特殊試劑使某些成分沉淀,經(jīng)分解沉淀得欲得的成分,如水溶性生物堿的分離常用雷氏鹽沉淀法。

鹽析法

鹽析法是在中藥水提液中,加入無機(jī)鹽至一定濃度,或達(dá)飽和狀態(tài),可使某些成分在水中溶解度降低,從而與水溶性大的雜質(zhì)分離。常作鹽析的無機(jī)鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。例如自黃藤中提取掌葉防己堿,自三顆針中提取小檗堿在生產(chǎn)上都是用氯化鈉或硫酸銨鹽析制備。有些成分如原白頭翁素、麻黃堿、苦參堿等水溶性較大,在提取時,亦往往先在水提取液中加入一定量的食鹽,再用有機(jī)溶劑提取。

分餾法

對于完全能夠互溶的液體系統(tǒng),可利用各成分沸點(diǎn)的不同而采用分餾法,中藥化學(xué)成分的研究工作中,揮發(fā)油及一些液體生物堿的分離即常用分餾法。例如毒芹總堿中的毒芹堿和羥基毒芹堿,前者沸點(diǎn)為166~167℃,后者為226℃,彼此相差較遠(yuǎn),即可利用其沸點(diǎn)的不同通過分餾法分離。

一般說來,液體混合物沸點(diǎn)相差在100℃以上,可將溶液重復(fù)蒸餾多次即可達(dá)到分離的目的,如沸點(diǎn)相差在25℃以下,則需采用分餾柱,沸點(diǎn)相差越小,則需要的分餾裝置越精細(xì)。

結(jié)晶法

結(jié)晶法是分離和精制固體成分的重要方法之一,是利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同來達(dá)到分離的方法。

結(jié)晶法所用的樣品必須是已經(jīng)用其他方法提得比較純的時候,才能采用此法精制,如果中藥的粗提取部分的純度很差,則很難得到結(jié)晶,因結(jié)晶乃同類分子自相排列,如果雜質(zhì)過多,則阻礙分子的排列。

有些中藥成分的結(jié)晶若含有兩種以上的成分時,就可用分步結(jié)晶法使之分離。

結(jié)晶的純度可由化合物的晶形、色澤、熔點(diǎn)和熔距、薄層色譜或紙色譜等作初步鑒定。一個單體純化合物一般都有一定的熔點(diǎn)和較小的熔距,同時在薄層色譜或紙色譜中經(jīng)數(shù)種不同展開劑系統(tǒng)檢定,也為一個斑點(diǎn)者,一般可以認(rèn)為是一個單體化合物。

色譜法

定義 色譜法又稱色層法或?qū)游龇?,是分離和鑒定化合物的有效方法。

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