?、倩鶊F影響：C₁₁-酮基的反應(yīng)速度快于C₁₁-羥基甾體；C₂₁-羥基酯化后較其母體羥基的反應(yīng)速度慢；當酯化了的基團為三甲基醋酸酯、磷酸酯或琥珀酸酯時，反應(yīng)更慢。

　?、谌軇┖退值挠绊懀汉看髸r會使呈色速度減慢，但含水量不超過5%時，對結(jié)果幾無影響，因此可采用95%乙醇。

　　③堿的種類及加入順序的影響：在各類堿中，采用氫氧化四甲基銨能得到滿意結(jié)果，故最為常用。以先加四氮唑鹽溶液再加堿液較好。

　　④空氣中氧及光線的影響：反應(yīng)及其產(chǎn)物對光敏感，故應(yīng)避光。

　?、轀囟扰c時間的影響：一般室溫或30℃恒溫條件下顯色。中國藥典多數(shù)醫(yī)學教育|網(wǎng)收集整理25℃暗處反應(yīng)40～45min.