B淋巴細胞表面標志的測定原理

人類B細胞表面帶SmIg，每一個B細胞表面帶有不同類的Ig，即IgM、IgD、IgG、IgA、或IgE.如用熒光法標記的抗人IgM、IgD、IgG、IgA及IgE抗體，分別同標記的熒光抗體染色，則熒光抗體與B細胞表面相應的SmIg結(jié)合，在熒光顯微鏡下觀察，凡與熒光標記抗體結(jié)合的細胞則細胞膜呈現(xiàn)熒光，為SmIg陽性細胞，即B細胞，同時用普通光源照明，醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理計數(shù)該視野的淋巴細胞總數(shù)，根據(jù)發(fā)熒光和不發(fā)熒光細胞的計數(shù)，可求得帶各類SmIg細胞的百分數(shù)。把這些數(shù)相加為血液中B細胞的百分數(shù)。

試劑

（1）異硫氰熒光素（FITC）標記的兔抗人IgG，兔抗人IgM抗體，F(xiàn)/P在分子比值為1～2.

（2）Hank液（含1.0g/L.NaN3），調(diào)pH至7.4.

（3）聚蔗糖-泛影葡胺淋巴細胞分層液（比重1.077）。

（4）50%PBS緩沖甘油。