
釉原蛋白是細胞外釉基質的主要蛋白種類,依據(jù)不同的種屬從Mr 20 000~27 000,富含疏水性的脯氨酸。其基因結構、染色體定位和一級結構基本清楚,不同種屬的釉原蛋白氨基酸序列高度同源[2]。釉原蛋白的轉錄與成釉細胞最初的極化有關。一旦基因開始表達,釉原蛋白隨之轉錄[3]。內釉上皮細胞的分化是由外胚間充質細胞相互作用誘導的,以后內釉上皮細胞開始分化為成釉細胞并表達釉原蛋白。在釉基質成熟階段,成釉細胞降低釉原蛋白的含量。雖然關于釉原蛋白確切的功能目前還不清楚,但它在釉質生物礦化的過程中起著決定性的作用,它參與Ca的轉運,控制釉質晶體的生長和大小[2]。
關于釉原蛋白的異質性,有兩個機理:一是在釉質發(fā)育階段細胞外蛋白酶對新生釉原蛋白分子的降解,產生了一系列小的蛋白片段[4];二是釉原蛋白轉錄時的交叉剪切[5],這種交叉剪切發(fā)生在多種種屬中,如牛、人、豬、小鼠、大鼠。有一些這樣交叉剪切的mRNA 可以在蛋白水平上檢測到[6]。我們用于原位雜交的探針是從大鼠cDNA質粒中轉錄的,包括所有七個交叉剪切位點的大部分編碼序列。釉原蛋白交叉剪切的mRNA 已經(jīng)在鐘狀期、分泌期、成熟期的成釉細胞中檢測到[7],因此在大鼠釉質發(fā)育的不同時期檢測的雜交信號可以代表不同的交叉剪切產生的mRNA.本實驗檢測了釉原蛋白在Wistar 大鼠牙胚發(fā)育各期的轉錄,顯示大鼠下頜第一磨牙最早可以檢測到Am mRNA是在出生后第1 d(鐘狀期、前成釉細胞正在極化的時期)。出生后前四 天成釉細胞Am mRNA 水平逐漸升高,到第5 d達到最高,以后隨著成釉細胞分化完成,成熟期成釉細胞中的表達持續(xù)在一個較低的水平。成牙本質細胞中未檢測到表達。因此可以說Am mRNA 在分泌性成釉細胞中高表達,在分泌后期細胞中的表達逐漸下降,分泌完成以后不表達。釉原蛋白量在整個分泌階段逐漸升高,成熟階段的早期達到高峰,然后快速下降。成熟釉質的細胞外基質中釉原蛋白分解消失。
細胞分泌和表達的基礎是細胞核內基因組有選擇的逐漸關閉或開放,導致某些成分的表達被抑制,而某些特異性蛋白表達開始并逐步增強[8]。但細胞核內基因組有選擇性表達并導致成釉細胞分泌、分化的調控因子有哪些,他們分別調控哪些基因的關閉和哪些基因的開放,迄今為止仍不清楚。
作者單位:西安第四軍醫(yī)大學口腔醫(yī)學院 710032
參考文獻
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