
?。?)骨髓采集:采集骨髓前數(shù)周先進(jìn)行供者自體循環(huán)采血,并達(dá)到一定的量,供采集骨髓時補(bǔ)充血容量之用。采集骨髓時對供者行硬膜外麻醉或全身麻醉,在髂前和髂后上棘多點穿刺,在輸血的同時,抽取骨髓與血液混合物l000ml左右。所采的單個核細(xì)胞(MNC)要求達(dá)到3×108/kg(受者體重),收集在加有肝素的組織保養(yǎng)液如1640及TCl99中,通過不銹鋼濾網(wǎng)去除凝塊及脂肪滴后靜脈滴注,緩慢輸給患者。
?。?)外周血干細(xì)胞的采集:外周血中造血干細(xì)胞含量較少,僅為骨髓的1%,干細(xì)胞采集前需用粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)進(jìn)行動員。再用血細(xì)胞分離機(jī)分離采集供者外周血單個核細(xì)胞(MNC)。要求采集的MNC達(dá)到3×108/kg(受者體重),CD34+細(xì)胞含量達(dá)到3×106/kg,CFU-GM達(dá)到3×104/kg。足量采集后從靜脈輸給受者。
?。?)臍血采集:應(yīng)在分娩后結(jié)扎臍帶移去胎兒娩出胎盤前,于無菌條件下,直接從臍靜脈采集,每份臍血量60-100ml左右。由于臍血的干細(xì)胞數(shù)量受限,臍血移植一般不適合體重大的受者。臍血可通過規(guī)范的臍血庫長期保存?zhèn)溆?。目前衛(wèi)生行政部門對臍血干細(xì)胞的采集、檢測和應(yīng)用有嚴(yán)格的規(guī)定。
骨髓血、外周造血干細(xì)胞或臍血可在4℃保存72h.加入冷凍保護(hù)劑(10%二甲亞砜),通過程控降溫,寄放在液氮(-196℃)中可超低溫長期保存。