臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)輔導(dǎo)資料：雜交瘤技術(shù)基本原理

單克隆是指利用在細(xì)胞融合基礎(chǔ)上的B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)。

雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時(shí)保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞）的主要特征是它的抗體分泌功能，但不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，小鼠骨髓瘤細(xì)胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力，形成同時(shí)具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。

一、B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)

二、T細(xì)胞雜交瘤

三、陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞形成后的初期很不穩(wěn)定，為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細(xì)胞對(duì)其生長(zhǎng)影響，必須將陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞分離培養(yǎng)，產(chǎn)生單克隆雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)2～3次檢測(cè)均為陽(yáng)性的雜交瘤單個(gè)細(xì)胞，才能進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。

克隆化培養(yǎng)后的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞應(yīng)及時(shí)凍存，最好保存在-196℃液氮中。