醫(yī)學教育網臨床醫(yī)學檢驗技士《答疑周刊》2015年7期：

【問題】化學發(fā)光免疫分析的類型及原理？

化學發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)，是將具有高靈敏度的化學發(fā)光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項最新免疫測定技術。

1化學發(fā)光免疫分析原理

化學發(fā)光免疫分析包含兩個部分,即免疫反應系統(tǒng)和化學發(fā)光分析系統(tǒng)?；瘜W發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學發(fā)光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化,形成一個激發(fā)態(tài)的中間體,當這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時,同時發(fā)射出光子(hM),利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統(tǒng)是將發(fā)光物質(在反應劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體)直接標記在抗原(化學發(fā)光免疫分析)或抗體(免疫化學發(fā)光分析)上,或酶作用于發(fā)光底物。

2化學發(fā)光免疫分析的類型

化學發(fā)光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:

(1)化學發(fā)光標記免疫分析法。

(2)酶標記、以化學發(fā)光底物作信號試劑的化學發(fā)光酶免疫分析法。

祝您學習愉快！

祝您順利通過考試！

感謝您對網校的支持！

【問題】Coombs試驗的配血原理是什么？

凡Coombs試驗即抗人球蛋白試驗，是檢測血液中溫反應性抗體的一種方法，也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標。溫抗體中50%以上由IgG介導，其次為IgM，IgA和C3d等，因此本試驗應分選各種單克隆抗體同時測定。Coombs試驗分為直接試驗（直接反應）和間接試驗（間接反應）：直接試驗的目的是檢查紅細胞表面的不完全抗體；間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

（1）直接coombs試驗用于檢測已粘附在紅細胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細胞充分洗滌后，將抗球蛋白試劑加入已結合有抗體的受檢紅細胞懸液中，即可見細胞凝集。可用玻片法做定性試驗，也可用試管法或微量法做半定量測定。用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等。

（2）間接coombs試驗用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標本加入具有特異抗原的紅細胞懸液中，如果抗原抗體相應則發(fā)生結合，再加入抗球蛋白抗體，則出現(xiàn)紅細胞凝集。本法多用于檢測母體Rh（D）抗體以及因紅細胞不相容的輸血而產生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補體血清等，分析與紅細胞表面結合的不完全抗體的Ig亞類。

【問題】肝細胞性黃疸,血中為什么兩種膽紅素都升高，尿膽原正?；蛏?？

要搞清楚這個問題，必須先弄清人體的膽紅素代謝過程：

在膽紅素(膽汁成分)的代謝過程中，肝細胞承擔著重要任務。首先是衰老紅細胞分解形成的間接膽紅素隨血液循環(huán)運到肝細胞表面時，肝細胞膜微絨毛將其攝取，進入肝細胞內，與Y、Z蛋白固定結合后送至光面內質網中，靠其中葡萄醛酸基移換酶的催化作用，使間接膽紅素與葡萄糖醛酸結合成直接膽紅素(色素I、II混合物)；在內質網、高爾基氏體、溶酶體等參與下直接膽紅素排泄到毛細膽管中去?？梢姼渭毎哂袛z取、結合、排泄膽紅素的功能。

當患肝炎時，肝細胞成為各種病毒侵襲的靶子和復制繁殖的基地，在機體免疫的參與下，肝臟大量細胞功能減退，受損壞死，致部分直接、間接膽紅素返流入血。血液中增高的膽紅素(34.2umol/L)把眼鞏膜和全身皮膚染黃，形成黃疸。

需要知道的是，各種肝炎患者的肝細胞并不是全部被破壞，健康的肝細胞會代償性地“努力工作”，而被破壞的肝細胞基本上喪失了各種功能，并且還可以將大量的非結合膽紅素、結合膽紅素直接釋放入血，造成血液里的總膽紅素、非結合膽紅素、結合膽紅素濃度都有升高。

在腸道中生成的尿膽原會有一部分被吸收入血，經門脈入肝。正常情況下這部分尿膽原大多被肝細胞重新轉變?yōu)榻Y合膽紅素，極少量沒被肝細胞吸收的才會經腎排出，這就是尿中的尿膽原。但肝細胞受損了，就不能轉化尿膽原了，所以從腸道吸收入血的尿膽原幾乎全部要經腎排出。這就是為什么腸道產尿膽原少了，尿中尿膽原反而多了。

因此肝細胞性黃疸：處理障礙。血中兩種膽紅素都升高，尿膽原正?；蛏?，尿膽紅素陽性。

【臨床血液學檢驗】

紅細胞數降低的程度比血紅蛋白更顯著，最可能的診斷是

A.失血

B.再生障礙性貧血

C.巨幼紅細胞性貧血

D.溶血

E.缺鐵性貧血

【正確答案】C

學員提問：失血，再生障礙性貧血，缺鐵貧，是怎樣的一個情況，它的紅細胞和血紅蛋白會有怎樣的一個變化?

解析：再生障礙性貧血呈全血細胞減少，貧血屬正常細胞型，亦可呈輕度大紅細胞。紅細胞輕度大小不一，但無明顯畸形及多染現(xiàn)象，一般無幼紅細胞出現(xiàn)。網織紅細胞顯著減少。

缺鐵性貧血早期或輕度缺鐵可以沒有貧血或僅極輕度貧血。晚期或嚴重缺鐵有典型的小細胞低色素型貧血。紅細胞壓積和血紅蛋白濃度降低的程度通過紅細胞計數減少的程度。還可見很少的靶形、橢圓形或其他不規(guī)則形態(tài)的紅細胞。網織紅細胞計數大多正常，白細胞計數正?；蜉p度減低。血小板計數高低不一。

祝您學習愉快！

祝您順利通過考試！

感謝您對網校的支持！

【臨床血液學】

紅細胞G-6-PD酶缺乏時，下列哪項試驗呈陽性反應

A．抗人球蛋白試驗

B．熱溶血試驗

C．高鐵血紅蛋白還原試驗

D．酸溶血試驗

E．血紅蛋白電泳出現(xiàn)異常區(qū)帶

【正確答案】C

學員提問：為什么

解答：紅細胞G6PD缺陷癥：本病分5型：蠶豆病、藥物致溶貧、感染誘發(fā)溶血、新生兒高膽紅素血癥和遺傳性非球形紅細胞溶貧。①篩檢試驗：高鐵血紅蛋白還原試驗：G6PD活性雜合子中等缺乏者74%～31%，臍血77%～41%；純合子或半合子G6PD嚴重缺乏者大于30%，臍血小于40%。G6PD熒光斑點法：G6PD活性中等缺乏者10～30min出現(xiàn)熒光；嚴重缺乏者30min不出現(xiàn)熒光。②確診試驗：G6PD活性減少。

酸溶血試驗是診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥的主要確診試驗。

酸溶血試驗，又稱Ham試驗。指病人紅細胞與酸化后的血清一起置37℃環(huán)境中作用，紅細胞發(fā)生破壞，即為陽性。

祝您順利通過考試！

感謝您對網校的支持！

【臨床化學檢驗】

關于細胞酶的釋放，錯誤的是

A．酶蛋白分子量的大?。涸囼炞C明酶釋放的速度和分子量成正比

B．胞質中游離的酶如ALT、LD最容易釋放入血

C．非血漿特異的酶在細胞內、外濃度可差千倍以上，只要有少量細胞受損傷，酶從細胞中釋出，就可使血液中酶明顯升高

D．血管內皮細胞和血細胞的酶直接進入血液

E．酶大部分進入組織間隙后再入血

【正確答案】C

學員提問：請解釋一下。

解答:細胞酶的釋放：是疾病時大多數血清酶增高的主要機制，影響細胞酶釋放的主要原因有：

1）細胞內、外酶濃度的差異：非血漿特異的酶在細胞內、外濃度可差千倍以上，只要有少量細胞受損傷，酶從細胞中釋出，就可使血液中酶明顯升高；

2）酶在細胞內的定位和存在的形式：胞質中游離的酶如ALT、LD最容易釋放入血，而在亞細胞結構中的酶則較難釋放出來，特別是線粒體酶，如肝細胞中的AST常需細胞出現(xiàn)壞死病變時才能釋放入血；

3）酶蛋白分子量的大?。涸囼炞C明酶釋放的速度和分子量成反比。此因素對酶在血液出現(xiàn)時間的影響大于對酶濃度高低的影響，例如LD分子量大于CK，而當有心肌梗死時，LD在血液中升高的時間就晚于CK。

（3）酶在細胞外間隙的分布和運送：細胞中酶有三種途徑進入血液，即：

1）血管內皮細胞和血細胞的酶直接進入血液；

2）酶可同時進入血液和組織間隙，后者再入血；

3）酶大部分進入組織間隙后再入血。

這些因素都會影響酶進入血液的時間和升高的程度。

（4）血液中酶的清除：不同疾病和不同的酶從血液中清除的時間和機制不同，同一疾病不同酶恢復正常的時間也不一樣，這和酶的半壽期以及一些其他因素有關

祝您順利通過考試！

感謝您對網校的支持！

醫(yī)學教育網臨床醫(yī)學檢驗技士：《答疑周刊》2015年07期（word版下載）