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革蘭氏染色法概述:
細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色,而經(jīng)碘液媒染后,用酒精脫色,在一定條件下有的細(xì)菌紫色不被脫去,有的可被脫去,因此可把細(xì)菌分為兩大類,前者叫做革蘭氏陽性菌(G+),后者為革蘭氏陰性菌(G-)。為觀察方便,脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀釋復(fù)紅等進(jìn)行復(fù)染。陽性菌仍帶紫色,陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)的球菌,以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應(yīng);弧菌,螺旋體和大多數(shù)致病性的無芽胞桿菌都呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。
在治療上,大多數(shù)革蘭氏陽性菌都對(duì)青霉素敏感(結(jié)核桿菌對(duì)青霉素不敏感);而革蘭氏陰性菌則對(duì)青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對(duì)青霉素敏感),而對(duì)鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區(qū)分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌,在選擇抗生素方面意義重大。
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有很多差別,染色反應(yīng)不一樣?,F(xiàn)在一般認(rèn)為革蘭氏陽性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復(fù)合物,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理它與碘和結(jié)晶紫的復(fù)合物結(jié)合很牢,不易脫色,陰性菌復(fù)合物結(jié)合程度底,吸附染料差,易脫色,這是染色反應(yīng)的主要依據(jù)。另外,陽性菌菌體等電點(diǎn)較陰性菌為低,在相同PH條件下進(jìn)行染色,陽性菌吸附堿性染料很多,因此不易脫去,陰性菌則相反。所以染色時(shí)的條件要嚴(yán)格控制。例如,在強(qiáng)堿的條件下進(jìn)行染色,兩類菌吸附堿性染料都多,都可呈正反應(yīng);PH很低時(shí),則可都呈負(fù)反應(yīng)。此外,兩類菌的細(xì)胞壁等對(duì)結(jié)晶紫—碘復(fù)合物的通透性也不一致,陽性菌透性小,故不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色。所以脫色時(shí)間,脫色方法也應(yīng)嚴(yán)格控制。
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