[生物化學(xué)]雙脫氧末端終止法測序體系與PCR反應(yīng)體系的主要區(qū)...

原題:
[生物化學(xué)]雙脫氧末端終止法測序體系與PCR反應(yīng)體系的主要區(qū)別是前者含有:?
選項(xiàng):
A.模板
B.引物
C.DNA聚合酶
D.ddNTP
E.緩沖液

答案:
D
解析:

答復(fù):本題選D。

一、雙脫氧末端終止法測序體系

  用一側(cè)引物對PCR產(chǎn)物進(jìn)行雙脫氧末端終止法測序反應(yīng),用一個(gè)ddNTP參入反應(yīng),產(chǎn)生長短不一的單鏈DNA ,然后進(jìn)行SSCP分析。可分別使用兩側(cè)的PCR引物,獲得一端平齊的長度不等的DNA單鏈。DDF方法克服了SSCP分析時(shí)因DNA長度影響SSCP顯示的困難,通過一種雙脫氧核苷酸產(chǎn)生異質(zhì)性的單鏈DNA,使其中長度合適的DNA片段顯示SSCP改變。

二、PCR反應(yīng)體系

標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
   10×擴(kuò)增緩沖液      10ul
   4種dNTP混合物    各200umol/L
   引物           各10~100pmol 
   模板DNA       0.1~2ug 
    Taq DNA聚合酶    2.5u 
   Mg2+         1.5mmol/L
   加雙或三蒸水至     100ul
PCR反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

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