由于中藥藥理學(xué)研究對象是中藥單味藥及其復(fù)方的藥理,無論是單味藥或復(fù)方,其所含的化學(xué)成分都很復(fù)雜。中藥藥理研究不能脫離中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)作用,不能忽略病與證的結(jié)合問題,從而決定中藥藥理學(xué)方法有其區(qū)別于一般藥理學(xué)方法的特殊性。
(1)中藥活性物質(zhì)和藥理活性的篩選方法:分為廣篩法和定向法兩種。廣篩法是設(shè)定明確的實驗指標(biāo),從大量的藥物、有效部位或單體中篩選出具有某種特殊作用的藥物。醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理如從大量的中藥成分中篩選出對白血病具有抑制作用的中藥青黛(有效成分靛玉紅);從對瘧原蟲鼠瘧的抑制篩選出具有抗瘧作用的中藥青蒿(有效成分青蒿素)等,均采用了廣篩法。定向篩選法是以中藥及其復(fù)方的功效、主治為線索,設(shè)計藥理實驗,驗證藥理作用。比較成功的例子如從理氣止痛中藥玄胡索中篩選出具有鎮(zhèn)痛作用的活性成分玄胡索乙素,從活血化瘀藥中研制治療冠心病的中藥復(fù)方等。
?。?)綜合集成的中藥藥性理論研究方法:中藥藥性理論是數(shù)千年來指導(dǎo)臨床實踐的基本理論,其內(nèi)涵包括四氣五味、歸經(jīng)、升降浮沉、毒性、炮制、配伍宜忌、組方原理等多個方面,又與中醫(yī)基礎(chǔ)理論緊密相聯(lián),將中藥藥性理論現(xiàn)代化、科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,事關(guān)中藥現(xiàn)代化、國際化的大局。但中藥成分的復(fù)雜性、中藥藥性理論的模糊性,決定了單靠一兩個學(xué)科很難揭示中藥藥性理論的規(guī)律。如從中藥基原而言,植物、動物來源的中藥,親緣關(guān)系愈近,活性成分愈相似,功效愈相似,而研究其中的規(guī)律就涉及到植物分類學(xué)、動物分類學(xué)、植物分子系統(tǒng)學(xué)、植物化學(xué)、中藥藥理學(xué)等學(xué)科;同一植物、動物基原,不同的藥用部位、不同的采集時間、醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理不同的炮制方法,其所含活性成分的質(zhì)和量有差異,藥性、功效主治也有差異,而研究其間的相互關(guān)系又需要集成藥用植物栽培、養(yǎng)殖技術(shù)、中藥炮制學(xué)的理論和方法。中藥進入人體,是一個復(fù)雜的過程,涉及到個體體質(zhì)的差異性。經(jīng)口用藥又有一個吸收、分布、代謝、排泄的過程,研究相關(guān)專題與血清藥化學(xué)、血清藥理學(xué)、藥代動力學(xué)、人類基因組學(xué)、疾病代謝組學(xué)有很大關(guān)系,因此,研究中藥藥性理論需要綜合多學(xué)科的知識和方法,穩(wěn)步推進,逐一突破,是一個長期的艱巨的系統(tǒng)工程。
?。?)中藥血清藥理學(xué)方法:中藥是一個含有多種成分的復(fù)合體,一般多使用粗制劑,經(jīng)口服用,經(jīng)過吸收、分布、代謝而發(fā)揮作用。針對這樣的實際狀況,日本學(xué)者在1984年提出“中藥血清藥理學(xué)”方法。它是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動物灌服一定時間后采集動物血液、分離血清,用此含有藥物成分的血清進行體外實驗,與用中藥粗制劑直接進行的體外實驗相比,既保持了體外實驗條件可控性強、藥物效應(yīng)易于檢測、可深入揭示藥物作用機理的優(yōu)點,又能夠防止中藥粗制劑本身的理化性質(zhì)對實驗的干擾,反映中藥在胃腸道消化吸收、再經(jīng)生物轉(zhuǎn)化、最后產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實過程,并代表了藥物在體內(nèi)產(chǎn)生作用的真正有效成分。目前在中藥藥理實驗研究中得到了推廣應(yīng)用。
?。?)病證動物模型方法:某些藥物,多在病理情況下才產(chǎn)生作用,如五苓散對健康人、正常小鼠、家兔均無利尿作用,但對有水代謝障礙者有利尿作用。白虎加人參湯能降低血氧嘧啶性糖尿病動物血糖,但對正常動物血糖無影響。所以要建立與臨床一致的病理模型進行藥理試驗。
①疾病模型:分為自發(fā)性疾病動物模型和誘發(fā)性疾病動物模型。前者是指對沒有經(jīng)過任何有意識的人工處理而在自然情況下發(fā)生基因突變、染色體畸變的實驗動物,醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理通過定向培育而保留下來的疾病模型。誘發(fā)性疾病動物模型是指通過使用物理、化學(xué)及生物學(xué)等方法,造成動物整體、器官或組織發(fā)生一定程度的損害,得到某些類似于人類疾病的動物模型。
?、谧C候模型:中醫(yī)證候是疾病發(fā)展到某一階段時對病因、病位、病性及正邪對比情況的病理概括。證候動物模型是指在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下,采用生物學(xué)等方法使動物出現(xiàn)中醫(yī)證候的表現(xiàn)。如用大黃飼喂小鼠使其出現(xiàn)類似人類的“脾虛證”,用夾尾法制作大鼠肝郁證模型,用糖皮質(zhì)激素喂飼制作大鼠或小鼠陰虛模型,用利血平皮下或肌肉注射制作小鼠陽虛模型,用氨水刺激小鼠制作肺虛痰組動物模型等,均是近年比較成功的證候模型。
?、鄄∽C結(jié)合模型:參合中醫(yī)的發(fā)病學(xué)說和西醫(yī)的致病原理復(fù)制動物模型。如用飲食不節(jié)、勞倦過度等因素造成大白鼠脾虛證模型,在此基礎(chǔ)上加用氯化鋁復(fù)制的Alzheimer型癡呆疾病模型。將家兔在禁水禁食18小時后,以速尿二度利尿脫水,造成“陰津虧虛”狀態(tài),然后注射大腸桿菌內(nèi)毒素以致“熱盛”,從而完成溫病陰虛熱盛模型的制作。采用中劑量鏈脲佐菌素腹腔內(nèi)注射及肥甘飲食持續(xù)喂養(yǎng)10周的方法,復(fù)制實驗性NID?鄄DM大鼠模型(消渴)等,均為比較成功的病證結(jié)合模型制作方法。