無論病人出現(xiàn)不能解釋的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，還是不能解釋的交感神經(jīng)癥狀，確診時需要證據(jù)表明這些癥狀與低血糖異常有關，并且血糖升高后癥狀好轉。異常低血糖診斷標準通常為：男＜50mg/dl（＜2.78mmol/L），女＜40mg/dl（＜2.5mmol/L）（饑餓72小時后正常男性，女性最低值），嬰兒和兒童＜40mg/dl（2.22mmol/L）。大多數(shù)低血糖見于胰島素或磺脲類藥治療病人或新近飲酒者，診斷一般沒有困難。

　　最初監(jiān)測包括對不能解釋的意識損害（或癲癇）病人進行快速血糖測定。若有異常低血糖，應立即推注葡萄糖（見下文治療）。隨著血糖升高，中樞神經(jīng)癥狀迅速緩解（見于大多數(shù)病人），可確診為饑餓性低血糖和藥物誘導低血糖。第一份血標本的一部分應以冰凍血漿保存，可用來測定血漿胰島素，胰島素原及C-肽水平，需要時可作藥物監(jiān)測。應測定血乳酸，pH和血酮。

　　實驗室檢查可鑒別不同病因。胰島素分泌胰腺腫瘤病人（胰島素瘤，胰島細胞癌）常有胰島素原和C-肽與胰島素平行增加。服用磺脲類藥物病人，C-肽水平應升高，血中藥物濃度亦應升高。外源性胰島素誘發(fā)低血糖病人（常為糖尿病病人的家屬或服務人員），胰島素原正常，C-肽水平下降。罕見的自身免疫低血糖病人，在低血糖發(fā)作期間，血漿游離胰島素明顯升高，血漿C-肽受抑，易檢測到血漿胰島素抗體。自身免疫性低血糖與偷用胰島素引起的低血糖的鑒別需要特殊研究。

　　胰島素瘤與其他原因的饑餓性低血糖的區(qū)別在于，經(jīng)常出現(xiàn)的突發(fā)意識模糊或喪失，在年病程中發(fā)作可變得更頻繁。發(fā)作特點是進食超過6小時后或過夜空腹后發(fā)作，有時鍛煉促發(fā)（如早餐前快速步行）?？勺园l(fā)緩解，常有病人攝入液體或糖類后病情好轉的病史。血漿胰島素水平升高[＞6μu/ml（＞42pmol/L）]伴低血糖，若排除偷用磺脲藥和胰島素時，則有利于提示胰島素瘤存在。

　　若陣發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的其他病因不明顯，病人可住院作饑餓試驗（fasttest），監(jiān)測其血糖，胰島素，胰島素原，C-肽水平。79%的胰島素瘤病人在48小時內出現(xiàn)癥狀，而98%的胰島素瘤病人在72小時內出現(xiàn)癥狀。若饑餓可重新出現(xiàn)癥狀，給予葡萄糖時迅速好轉，在癥狀出現(xiàn)時伴有異常低血糖和異常高胰島素血癥，則可確診胰島素分泌腫瘤。其他診斷方法（如靜脈推注甲磺丁脲）只在有使用經(jīng)驗的咨詢中心進行，很少采用。一般來說，胰島素瘤極小，標準X線或CT難以探及。擬診病人在術前應去咨詢中心，由經(jīng)驗豐富的醫(yī)生作評估。

　　飲食性低血糖癥只應考慮有胃腸道手術史的病人，其餐后腎上腺素能癥狀可被選擇性攝入碳水化合物而緩解。可通過家庭血糖監(jiān)測來評估癥狀和血糖間關系（如餐后1，2小時及每當癥狀出現(xiàn)時測血糖）?？诜悄土吭囼灒∣GTT）不是診斷飲食性低血糖癥的可靠方法。