1.標本采集:根據(jù)葡萄球菌感染所致的疾病不同,可采集膿汁、滲出液、傷口分泌物、血液、尿液、糞便、痰液以及脊髓液等。(不同疾病采集不同標本)
2.檢驗方法及鑒定
(1)直接鏡檢:無菌取膿汁、痰、滲出物和腦脊液(離心后取沉渣)涂片,經(jīng)革蘭染色后鏡檢,如為革蘭陽性球菌呈葡萄狀排列可初步報告為:“找到革蘭陽性葡萄狀排列球菌,疑為葡萄球菌”。
(2)分離培養(yǎng):血液標本(靜脈血約5ml)注入50ml葡萄糖肉湯或含硫酸鎂肉湯增菌培養(yǎng),迅速搖勻,以防凝固,置35℃,一般于24h后開始觀察有無細菌生長,若均勻混濁,溶血及膠胨狀生長,則接種于血瓊脂,進一步鑒定,若無細菌生長,于48~72h后自行觀察(一般以7天為限),并接種血瓊脂,以確定有無細菌生長。血液標本也可注入商品血培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
膿汁、尿道分泌物、腦脊液離心沉淀物,通常可直接接種血瓊脂。35℃18~24h培養(yǎng),醫(yī)學教|育網(wǎng)搜集整理可見直徑2~3mm,產(chǎn)生不同色素的菌落。金黃色葡萄球菌在菌落周圍有透明的溶血環(huán)。
尿液標本,必要時作細菌菌落計數(shù)。
糞便、嘔吐物應接種高鹽卵黃或高鹽甘露醇瓊脂平板,經(jīng)35℃18~24h培養(yǎng),可形成細小菌落,48h后形成典型菌落。
?。?)鑒定試驗
金黃色葡萄球菌 | 表皮葡萄球菌 | 腐生葡萄球菌 | |
觸酶 | + | + | + |
血漿凝固酶 | + | - | - |
甘露醇發(fā)酵試驗 | + | - | - |
新生霉素敏感試驗 | S | S | R |
?。?)耐藥性檢測:檢測耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的表葡菌(MRSE),耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌(VRSA),耐萬古霉素的表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLSI推薦用頭孢西丁紙片法檢測對苯唑西林耐藥的葡萄球菌。