免疫速率散射比濁法是檢驗主管技師考試輔導的部分內容,以下是醫(yī)學教育網(wǎng)對這塊內容的整理,希望對考生有所幫助:
其原理是指一定波長的光通過溶液遇到抗原抗體復合物時,光線被折射,發(fā)生偏轉。偏轉角度可以從0-90°,這種偏轉的角度可因光線的波長和復合物大小不同而有所區(qū)別。散射光的強度與復合物的含量成正比,即待測抗原越多,形成的復合物也越多,散射光也越強。同時也和散射夾角成正比,和波長呈反比。
測定方法有終點法和速率法兩種。
終點法是在抗原-抗體反應達到平衡時,即復合物形成后作用一定時間,通常是30-60min,復合物濁度不再受時間的影響,但又必須在聚合產生絮狀沉淀之前進行濁度測定。
速率法是在抗原抗體結合反應的過程中,在單位時間內兩者結合的速度。速率法是測最大反應的速度,即反應達到頂峰時的峰值。抗原抗體結合反應在幾十秒內得出結果,峰值的高低與抗原的量成正比,峰值出現(xiàn)的時間和抗體濃度、抗原抗體的親和力直接相關。速率法的靈敏度和特異性都比終點法好。
但是,必須指出的是對免疫濁度法存在難以克服的鉤狀效應。即在定量抗體中加入抗原量達到最佳比例時,形成的IC量最大,反應速度最快。如繼續(xù)加入抗原,形成IC的量不但不再增加,反而減少;反之,在定量抗原中加入抗體,在抗體過量時也會產生同樣的現(xiàn)象。這種后帶(抗原過量)和前帶(抗體過量),統(tǒng)稱為鉤狀效應(hook effect)。鉤狀效應可以產生假象的弱陽性或假陰性結果。