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微生物培養(yǎng)基手冊(cè)大全

2012-09-06 17:36  來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)    打印 | 收藏 |
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  1、營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通瓊脂)

  成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏湯) 100毫升瓊脂(視天氣,瓊脂質(zhì)量而定)

  制法:將上物加熱溶解,補(bǔ)足水,調(diào)ph至7.6,過濾分裝121℃,高壓滅菌15分鐘。

  用途:作普通瓊脂平皿。

  2、血瓊脂平板(BA)

  制法:取營(yíng)養(yǎng)瓊脂(PH7.6),加熱使其溶解待冷至45-50℃,以滅菌操作于每100毫升營(yíng)養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻,立即傾注于平板或分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?/p>

  用途:1. 一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。

  2.尿液,膿液

  3.分離細(xì)菌標(biāo)本用。

  3、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (肉膏湯BB)

  成份:蛋白胨 10克     牛肉膏 5克 氯化鈉 5克     水     1000毫升

  制法:將以上各物稱好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,過濾分瓶,121℃高壓滅菌,20分鐘備用。

  用途:1 作耐藥試驗(yàn),增菌用分裝小管。

  2 作普通瓊脂斜面。

  4、血液培養(yǎng)基(大管肉湯培養(yǎng)基)

  成份:1 新鮮牛肉浸液 1000毫升

  2 PABA(對(duì)氨基苯甲酸〔相當(dāng)于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升

  3 MgSO4 [相當(dāng)于0.493/100毫升]    49.3% 1毫升

  4 枸椽酸鈉                      0.3g

  制法:1 將1號(hào),4號(hào)混合液,2號(hào),3號(hào)液分裝高壓滅菌。

  2 取滅菌1,4號(hào)混合液用無菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行無菌試驗(yàn)三天方可使用。

  用途:作血,骨髓培養(yǎng)用。

  5、腸道桿菌培養(yǎng)基(伊紅美蘭瓊脂)

  成份: 蛋白胨 10克       乳糖     10克    氯化鈉 5克       瓊脂     25(22)克     水    1000毫升     2%伊紅溶液20毫升     0.5%美蘭溶液 20毫升

  制法:將蛋白胨,氯化鈉瓊脂稱好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4過濾,補(bǔ)足失水,加入2%伊紅溶液20毫升,0.5%美蘭溶液20毫升,(115℃高壓20分鐘),冷卻至50℃左右傾注平板,凝固后存冰箱備用。(高壓以后方可再加乳糖)

  用途:用作分離沙門氏,志賀氏菌屬,也作菌群調(diào)查。

  6、羅文斯坦培養(yǎng)基

  成份:磷酸二氫鉀     2.4克       硫酸鎂 0.24克

  枸椽酸鈉    0.6克       天門冬素 3.6克

  純甘油(丙三醇) 12毫升       水     600毫升

  馬鈴薯粉    30克           雞蛋 1000毫升(約3公斤)

  2%孔雀綠水溶液 20毫升

  制法:1 除雞蛋外(還有孔雀綠)?蓪⑵渌锲贩Q好,放入大三角瓶包扎好,高壓滅菌。

  2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘,滅菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶?jī)?nèi)充分將雞蛋搖散。

  3 將各成份按比例配好,分裝每管約5毫升。

  4 間歇滅菌第一次90℃1小時(shí),第二次80℃半小時(shí),第三次80℃半小時(shí)(或放85℃烤箱內(nèi)連續(xù)二次)。

  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn): 1 滅菌試驗(yàn)合格。

  2 接種結(jié)核桿菌要求兩星期生長(zhǎng)良好。

  用途:作結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)用。

  7、結(jié)核半固體培養(yǎng)基

  成份:磷酸氫二鈉    19克           硫酸鎂     0.6克

  磷酸二氫鉀    2.5克       天門冬素 5克

  1%孔雀綠    1.5克           甘油    20毫升

  吐溫80(10%) 5毫升           水    1000毫升

  枸椽酸鈉       2.5克           動(dòng)物血清 100毫升

  瓊脂           1.5克(80小時(shí)用甲醇去脂)

  1%孔雀綠    0.78毫升    吐溫80(10%) 5毫升

  加動(dòng)物血清     100毫升

  制法: 1 除血清外將上述藥品均稱好,放入煮沸溶解,調(diào)PH7.2

  2 分管(每管約10毫升)包扎好,高壓,121℃半小時(shí)滅菌。

  3 待冷后無菌法加無菌血清(綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。

  4 去除瓊脂方法:取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封,放37℃溫浴80小時(shí),每天搖動(dòng)一次,冷卻后到時(shí)取出用濾紙過濾,待瓊脂自然冷卻后備用。

  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌實(shí)驗(yàn)合格。

  2瓊脂硬度合適而清亮。

  3接種標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核桿菌用,強(qiáng)度合適即可用。

  用途:培養(yǎng)結(jié)核桿菌用。

  8、亞碲酸鉀血瓊脂平板

  成份:瓊脂基礎(chǔ) 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升

  1%亞碲酸鉀 4.5毫升    綿羊血    10毫升

  制法:1將瓊脂基礎(chǔ)溶解好,加入羊血。

  2馬上加熱使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4.5毫升混合后倒入無菌平板,凝固后存冰箱備用。

  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):接種白喉?xiàng)U菌生長(zhǎng)良好,其它革蘭氏陰性菌均抑制生長(zhǎng)。

  用途:供培養(yǎng)及鑒別白喉?xiàng)U菌用。

  9、米培養(yǎng)基

  成份:白米    20克           水     1000毫升

  瓊脂    20克       吐溫80 10毫升

  制法:1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘,煮時(shí)將容器蓋好。

  2用紗布過濾,只要米湯,不要飯,加水至1000毫升。

  3加瓊脂20克,吐溫-80 10毫升煮溶,分裝中型管(每管約3毫升),包扎好,高壓,121℃半小時(shí),消毒備用。

  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1滅菌。

  2要求清亮。

  3接種白色念珠菌17-24小時(shí)生長(zhǎng)良好,并產(chǎn)生厚膜孢子。

  用途:培養(yǎng)白色念珠菌用。

  10、蛋白胨水培養(yǎng)基

  成份:蛋白胨 1克    氯化鈉     0.5克

  水加至 100毫升     PH調(diào)至     7.8

  制法:把以上各物稱好溶于水,調(diào)節(jié)PH7.6分裝消毒備用。

  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1 放置37℃無菌生長(zhǎng)。

  2 接種大腸桿菌24小時(shí)生長(zhǎng)良好。

  3 可作中國(guó)蘭平板基礎(chǔ)液。

  可作靛基質(zhì)基礎(chǔ)液(作此試驗(yàn)需要色氨酸蛋白胨)。

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