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尿液分析儀檢驗(yàn)

2012-03-27 16:13 來源:
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1、尿PH檢查結(jié)果有二重含義:①反映體內(nèi)酸堿代謝狀態(tài);②由于尿蛋白、尿比密的測(cè)定原理是基于膜尬上最后PH試劑的顏色變化,因此分析PH變化還有監(jiān)控尿PH變化對(duì)其它膜尬區(qū)反應(yīng)的干擾作用。

2、尿比密檢查尿比密測(cè)定曾采用懸浮法和折射儀法,主要測(cè)定尿內(nèi)固體物濃度隨著10項(xiàng)尿液分析儀的問世,試帶法測(cè)定尿比密得到廣泛使用,其膜塊中主要含有多聚電解質(zhì)(甲乙烯酸酰馬不酐)、酸堿指示劑及緩沖物,這是采用酸磚瓦指示劑法,其原時(shí)是根據(jù)經(jīng)過多聚電解質(zhì)的Pka改變與尿液離子濃度相關(guān)原理。麻劑條中的多聚電解質(zhì)含有隨尿標(biāo)本中離大濃度則解離的酸性基團(tuán),離子越多,酸性基團(tuán)解離子越多,而使膜尬中的PH改變,這種改變可由膜塊中的酸堿性指示劑的顏色變化顯示出來,進(jìn)而換算成尿液的比密值。

3、尿蛋白檢查尿液分析儀尿蛋白測(cè)定是根據(jù)指示劑蛋白誤差原理,膜塊中主要含有酸堿性指示劑棗溴酚蘭、枸櫞酸緩沖系統(tǒng)和表南的活性劑。在PH3.2時(shí),溴酚產(chǎn)生的陰離子,與帶陽離子的蛋白質(zhì)(白蛋白)結(jié)合后發(fā)生顏色變化。 干化學(xué)法測(cè)定尿蛋白操作簡(jiǎn)單快速,但在使用應(yīng)注意:①病人服用奎寧和磺胺嘧啶等藥物引起的強(qiáng)堿性尿時(shí)''會(huì)使干化學(xué)法出現(xiàn)假陽性結(jié)果而磺基水楊酸法出南假陰性結(jié)果??捎孟∫宜釋⒛蛞篜H調(diào)5-7''再行實(shí)驗(yàn)''借以區(qū)別是否由于強(qiáng)堿性尿而導(dǎo)致假陽性。②研究證明幾十種藥物可使尿蛋白檢查出現(xiàn)假陽性''有學(xué)者對(duì)用大劑量青霉素患者給藥前后進(jìn)行了尿蛋白的檢測(cè)''結(jié)果表明:滴注250萬單位組2小時(shí)\320萬單位3組小時(shí),480萬單位組5小時(shí)可能對(duì)磺基水楊酸法產(chǎn)生假陽性,對(duì)干化學(xué)法產(chǎn)生假陰性。③不同測(cè)定方法對(duì)病人尿液內(nèi)不同種類蛋白質(zhì)檢測(cè)的敏感不同,雙縮脲定量可以對(duì)白蛋白,球蛋白顯赤似的敏感性,而干化學(xué)測(cè)量球蛋白的敏感性僅是白蛋白的1/100-1/50.因此對(duì)于腎病患者特別是在疾病發(fā)展過種中需在系統(tǒng)觀察尿蛋白含量的病例應(yīng)使用磺基水楊酸法(或加熱乙酸法)定性和雙縮脲法進(jìn)行定量試驗(yàn)。④標(biāo)本內(nèi)含有其它分泌物(如生殖系統(tǒng)分泌物)或含有較多細(xì)胞成分時(shí),可引起假陽性。 NCCLS建議以磺基水楊權(quán)法作為干化學(xué)檢測(cè)尿蛋白的參比方法。

4、尿葡萄糖測(cè)定尿試帶法測(cè)定尿葡萄糖是采用酶法。其膜塊中含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶和色原。不同廠家采用的色源有異主要有二類:①采用碘化鉀做色原,陽性反應(yīng)呈紅色;②采用鄰甲聯(lián)苯胺作色原,陽性反應(yīng)呈藍(lán)色。其測(cè)定原量是葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和過氧化氫,后者再由過氧化物酶催化釋放出,而使色原呈顏色,以此類方法最常用。 尿試帶法在使用中應(yīng)注意:①尿試帶法與班氏定性法的特異性不同前者的特異性強(qiáng),吸與葡萄糖反應(yīng);而后者與尿內(nèi)反有不原性糖和所有還原性物質(zhì)都反應(yīng),故在尿試帶法呈陰性的標(biāo)本有可能在班氏法呈陽性結(jié)果;②干化學(xué)法與班氏法的靈敏度不同,干化學(xué)法的靈敏度高,葡萄糖含量為1.67-2.78mmol/L時(shí)即可出現(xiàn)弱陽性;而班氏法8.33mmol/L才呈弱陽性表現(xiàn);③干擾物質(zhì)對(duì)兩法的影響不同:尿液內(nèi)含有對(duì)氧親和力較強(qiáng)的還原物質(zhì)可與班氏法中的銅離子作用產(chǎn)生假陽性,但卻可使干化學(xué)法試帶產(chǎn)生的H2O2還原顯色而使其成假陰性。排除的方法是先將尿液煮沸幾分鐘破壞維生素C再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?,F(xiàn)已有含維生素C氧化酶的試帶的可以排除這一干擾。④干化學(xué)法測(cè)定尿葡萄糖只是一般的半定量試驗(yàn),它所設(shè)計(jì)的濃度水平與傳統(tǒng)的班氏存在的著差異,二者有可相互比;;交,因此對(duì)于糖尿病的動(dòng)態(tài)觀察,在干化學(xué)出現(xiàn)陽性結(jié)果時(shí),最好用濕化學(xué)定量方法,以確立準(zhǔn)確的尿葡萄糖范圍或收集晝夜尿標(biāo)本作尿糖定量。

5、尿酮體檢查檢測(cè)尿酮體的膜塊中主要含有亞硝基鐵氰化鈉,或與尿液中的乙酰乙酸、丙酮主生紫色反應(yīng)。其對(duì)乙酰乙酸的敏感性為50-100mg/L對(duì)丙酮?jiǎng)t為400-700mg/L,不與β-羥丁酸起反應(yīng)。 在使用中就注意:①由于尿酮體中的丙酮和乙酰乙酸都具有揮發(fā)性,酰乙酸更易受熱妥解成丙酮;尿液被細(xì)菌污染后,酮體消失,因此尿液必須新鮮,及時(shí)送檢,以免因酮體的揮發(fā)或分解出現(xiàn)假陰性結(jié)果或結(jié)果偏低;②干學(xué)法與酮體粉法靈敏度存在差異:酮體粉法對(duì)乙酰乙酸與丙酮的敏感性分別為80mg/L和100mg/L.不如試帶法敏感,故同一病理標(biāo)本兩面種方法可能出現(xiàn)結(jié)果的差異,分析結(jié)果時(shí)應(yīng)特別注意;③不同病因引起的酮癥,酮體的成分不同,即使一病人不同病程也可有差異,例如在糖尿病酮癥酸中毒早期病命名中,主要酮體成分β羥丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此時(shí)測(cè)得結(jié)果可導(dǎo)致對(duì)總酮體量估計(jì)不足。在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后,β-羥丁酸轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴R宜?,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易?duì)病情估計(jì)過重。因此檢驗(yàn)人員必須注意病程發(fā)展,與臨床醫(yī)生共同分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

6、尿膽紅素、尿膽原檢查尿膽紅素測(cè)定原理是結(jié)合膽紅質(zhì)在強(qiáng)酸性介質(zhì)中,與2,4-二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應(yīng)呈紫紅色;測(cè)定尿膽原的原理與改良Ehrlich法相同。 兩個(gè)方法主要注意點(diǎn)為:①標(biāo)本必須新鮮,以免膽紅素在陽光照射下成為膽綠素;尿膽原在氧化成尿膽素。②尿液中含高濃度維生素C和亞硝酸鹽時(shí),抑制偶氮反應(yīng)使尿膽紅素呈假陰性。當(dāng)患者接受大量的氯丙嗪治療或尿中含有鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)生時(shí),可呈假陽性。③尿液中一些內(nèi)源物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素等可使尿膽原檢查結(jié)果出現(xiàn)陽性,一些藥物也可產(chǎn)色干擾實(shí)驗(yàn)。④正常人尿膽原排出理每天波動(dòng)很大,夜間和上午量少,午后則迅速增加,在午后2-4時(shí)達(dá)最高峰;同時(shí)尿膽原的清除率與尿PH相關(guān),PH5.0時(shí),清除率為2ml/min;Ph8.0時(shí)增加至25ml/min,因此有學(xué)者倡用預(yù)先給予患者服用碳酸氨鈉,以堿化尿液慢集午后2-4時(shí)尿(2小時(shí)排出量)進(jìn)行測(cè)定,以提高檢出率。

7、尿亞硝酸鹽檢查膜塊中主要含有對(duì)氨基苯砷酸和1,2,3,4-四羥基對(duì)苯喹啉-3酚。大多當(dāng)數(shù)尿路感染由大腸埃希菌引起的,正常人尿液中含有來自食物或蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的硝酸鹽,池尿液中有大腸埃希菌感染增殖時(shí),將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,可將膜塊中對(duì)氨基礎(chǔ)苯砷酸重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4-四羥基對(duì)苯喹啉-3鞭偶聯(lián)使膜塊產(chǎn)生紅色,借以診斷患者是否被大腸埃希菌感染,其檢出敏感度為0.03-0.06g/l .尿液中亞硝酸鹽檢出率受感染細(xì)菌是否含有硝酸鹽還原酶,食物中是否含有選題的硝酸鹽、尿液標(biāo)本是否在膀胱停留4小時(shí)以上三者影響,符合上述三個(gè)條件,此試驗(yàn)的檢出率為80%,反之可呈現(xiàn)陰性結(jié)果。因此本試驗(yàn)陰性關(guān)不能排除細(xì)菌尿的可能,以樣亞硝酸鹽試驗(yàn)陽性也不能完全肯定泌尿系統(tǒng)感染,標(biāo)本放置過久或污染可呈假陽性,應(yīng)結(jié)合其它尿液分析結(jié)果,綜合分析得出正確的判斷。

8、尿白細(xì)胞檢查尿試帶法檢查尿內(nèi)白細(xì)胞的原理基于中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶,可或作用于膜塊中的吲哚酚酯,關(guān)與重氮鹽反應(yīng)形成紫色縮合物,其顏色深淺與中性粒細(xì)胞的多少呈正比例關(guān)系。操作時(shí)應(yīng)注意:①尿液標(biāo)本必須新鮮,留尿后應(yīng)立即測(cè)定,以免白細(xì)胞契壞,導(dǎo)致干化學(xué)法與鏡檢法人為的實(shí)驗(yàn)誤差;②此法只能測(cè)中性粒細(xì)胞,不與單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞反應(yīng),在腎移植病人發(fā)生排異反應(yīng)時(shí),尿中的以滿面春風(fēng)巴細(xì)胞為主的或其它病因引起的單核細(xì)胞尿時(shí)會(huì)產(chǎn)生陰性結(jié)果;③尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時(shí),吉產(chǎn)生假陽性;尿蛋白>5g/L或尿液中含有大劑量先鋒霉素等紅物時(shí),可便結(jié)果偏低或出現(xiàn)假性結(jié)果。 由于尿液分析儀白細(xì)胞檢測(cè)與顯微鏡下計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理截然不同,其報(bào)告方式也是兩種不同的概念,很難找出兩者的對(duì)應(yīng)關(guān)系,迄今還沒有一種直接的換算方式,因此儀器法白細(xì)胞檢查只是一個(gè)篩選試驗(yàn),絕不可代替顯微鏡檢查。?9、尿血紅蛋白、尿紅細(xì)胞檢查膜塊中主要含有過氧化氫茄香素或過氧化氫烯鈷和色原(如鄰甲聯(lián)苯胺)兩種物質(zhì)。其原理為尿液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白或其破壞釋放出的血紅蛋白均具有過氧化氫酶樣活性,可使過氧化氫茄香素或過氧化氫烯鈷分解出,后者能氧化有關(guān)色原

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