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紫外分光光度法(三點校正法)
原理:本法是在三個波長處測定吸收度,根據(jù)校正公式計算吸收度A校正值后,再計算含量,故本法亦稱“三點校正法”。原理如下:
?、匐s質(zhì)的吸收在310~340nm波長范圍內(nèi)呈一條直線,且隨波長的增大,吸收度變小。
②物質(zhì)對光的吸收具有加和性。
三點波長的選擇法
①第1點:選擇維生素A的最大吸收波長(即λ1)。
?、诘?點和第3點:在最大吸收波長的兩側(cè)各選一點(即λ2和λ3)。
等波長差法:在λ1的左右各選一點為λ2和λ3,使λ3-λ1=λ1-λ2.維生素A醋酸酯。
等吸收法:在λ1的左右各選一點為λ2和λ3,使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1.維生素A醇。
?、垭s質(zhì)吸收:對維生素A的測定有影響的雜質(zhì)主要有:維生素A2和維生素A3;維生素A的氧化產(chǎn)物(環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸);維生素A在光照下產(chǎn)生的醫(yī)學敎育網(wǎng)無生物活性的聚合物鯨醇。