測(cè)定淀粉酶的方法原理是什么呢
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淀粉酶的測(cè)定結(jié)果受方法的影響較大,不同方法參考值亦有所不同,臨床所用方法也較多,因此必須了解所用測(cè)定方法和其參考值,才能作出正確的診斷。
原理:
把病人的標(biāo)本(含淀粉酶)和底物的多糖一起進(jìn)行反應(yīng),測(cè)定反應(yīng)后的剩余底物或生成的產(chǎn)物來計(jì)算淀粉酶的活性。
底物一般含有4~7葡萄糖(戊糖、庚糖等),并連有發(fā)色基團(tuán)如β-2-氯-4-硝基酚-G7等。經(jīng)葡萄糖苷酶催化水解為黃色的對(duì)硝基酚和葡萄糖。
對(duì)硝基苯酚的生成量在一定范圍內(nèi)與AMY活性成正比,在405nm可以進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)即可測(cè)出AMY的活性。
注意事項(xiàng)
(1)很多陰離子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-為最強(qiáng)。
(2)血清甘油三酯濃度高時(shí),可以抑制淀粉酶活性,應(yīng)將標(biāo)本加以稀釋,以降低其影響。
(3)肝素抗凝由于Ca2+是淀粉酶分子組成的部分,一般抗凝劑如草酸鹽,枸櫞酸鹽等因能與Ca2+結(jié)合,抑制淀粉酶活性而不宜應(yīng)用。
(4)淀粉酶的測(cè)定方法操作要簡(jiǎn)單、快速,適于急診應(yīng)用,因?yàn)榧毙砸认傺仔枰M快診斷和治療。
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