雜交瘤技術(shù)是制備單克隆抗體的重要方法之一。這項(xiàng)技術(shù)的基本原理是將一種能夠產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞（通常從免疫過的小鼠脾臟中獲得）與另一種具有永生化能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。這種雜交瘤細(xì)胞既保留了B淋巴細(xì)胞分泌特定抗體的能力，又獲得了骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)。

具體步驟如下：
1. 免疫小鼠：首先選擇適合的小鼠品系，用目標(biāo)抗原免疫小鼠，使體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)該抗原的特異性B淋巴細(xì)胞。
2. 脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合：取免疫后小鼠脾臟中的B淋巴細(xì)胞，并將其與預(yù)先準(zhǔn)備好的骨髓瘤細(xì)胞按照一定比例混合，在促融劑（如聚乙二醇PEG）的作用下進(jìn)行細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞。
3. 選擇性培養(yǎng)基篩選：將上述融合產(chǎn)物接種于HAT選擇性培養(yǎng)基中，只有成功融合的雜交瘤細(xì)胞能夠存活并生長(zhǎng)。未融合或自相融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）而無法在該培養(yǎng)基上生存。
4. 克隆化篩選：通過有限稀釋法等方法對(duì)陽性雜交瘤進(jìn)行克隆化，挑選出能穩(wěn)定分泌所需特異性單抗的單一細(xì)胞系。
5. 擴(kuò)增與保存：將篩選得到的優(yōu)質(zhì)雜交瘤細(xì)胞株在體外大規(guī)模培養(yǎng)或體內(nèi)注射到小鼠腹腔內(nèi)大量生產(chǎn)單抗，并可長(zhǎng)期凍存?zhèn)溆谩?br/>
通過上述過程制備出來的單克隆抗體具有高度均一性和特異性，廣泛應(yīng)用于科研、診斷試劑開發(fā)以及臨床治療等領(lǐng)域。