單克隆抗體制備的核心步驟主要包括以下幾個(gè)方面：

首先是免疫動(dòng)物，選擇合適的動(dòng)物（如小鼠）注射特定的抗原物質(zhì)，以刺激其體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)該抗原的特異性抗體。

然后是細(xì)胞融合，從免疫后的動(dòng)物脾臟中提取B淋巴細(xì)胞，并與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。通過(guò)使用聚乙二醇等促融劑來(lái)促進(jìn)兩種細(xì)胞之間的融合，形成雜交瘤細(xì)胞。

接著是篩選和克隆化，將上述獲得的雜交瘤細(xì)胞接種到選擇性培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基）中，只有成功融合且具有無(wú)限增殖能力的雜交瘤細(xì)胞能夠存活并生長(zhǎng)。通過(guò)有限稀釋法或軟瓊脂平板法等技術(shù)對(duì)陽(yáng)性克隆進(jìn)行篩選和純化。

最后是單抗生產(chǎn)與鑒定，將經(jīng)過(guò)多輪篩選得到的分泌目標(biāo)抗體的單一雜交瘤細(xì)胞系擴(kuò)大培養(yǎng)，并采用體內(nèi)（腹腔注射）或體外（懸浮培養(yǎng)）方式大量制備單克隆抗體。同時(shí)，還需對(duì)抗體的特異性、親和力等性質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)分析。

這些步驟共同構(gòu)成了單克隆抗體制備的基礎(chǔ)流程。