雜交瘤技術(shù)是制備單克隆抗體的重要方法，其基本原理是將能夠產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞與具有無限增殖能力的骨髓瘤細胞進行融合，形成既能分泌特定抗體又可以持續(xù)分裂的雜交細胞。這個過程主要包括以下幾個步驟：
1. 免疫動物：首先選擇合適的動物（如小鼠）注射抗原物質(zhì)，使動物體內(nèi)產(chǎn)生針對該抗原的特異性B淋巴細胞。
2. 細胞融合：從免疫后的動物脾臟中獲取含有特異性抗體生成能力的B淋巴細胞，并與骨髓瘤細胞混合，在聚乙二醇(PEG)等化學誘導劑的作用下促使兩種細胞融合形成雜交瘤細胞。
3. 篩選和克隆化：將融合后的細胞培養(yǎng)在選擇性培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基）中，其中只有成功融合的雜交瘤細胞能夠存活并增殖。然后通過有限稀釋法或其他方法進行單個細胞的克隆化擴增，以確保每個克隆都來源于單一的雜交瘤細胞。
4. 抗體檢測：對各個克隆產(chǎn)生的抗體進行特異性、親和力等方面的測試，篩選出最優(yōu)秀的雜交瘤細胞系。
5. 擴大培養(yǎng)與純化：將選定的優(yōu)質(zhì)雜交瘤細胞株在大規(guī)模條件下進行無血清或低血清條件下的懸浮培養(yǎng)，收集上清液并采用親和層析等技術(shù)從其中分離純化單克隆抗體。

通過上述步驟，可以得到高純度、高度特異性的單克隆抗體。這些抗體廣泛應用于科研、診斷試劑盒開發(fā)以及治療性藥物等領(lǐng)域。