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分光光度計如何測定樣本濃度?

2025-06-23 15:21 來源:正保醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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分光光度計是一種常用的實驗室儀器,它通過測量特定波長下溶液對光線的吸收來確定溶液中物質(zhì)的濃度。下面是使用分光光度計測定樣本濃度的基本步驟:
1. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和樣品:根據(jù)需要檢測的物質(zhì)性質(zhì),配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,并準(zhǔn)備好待測樣品。
2. 選擇合適的波長:不同的物質(zhì)在不同波長下有最大的吸收值,這個最大吸收值稱為該物質(zhì)的最大吸收峰。根據(jù)所測定物質(zhì)的特點,選擇合適的工作波長進(jìn)行測量。
3. 零點校準(zhǔn):使用空白對照液(通常為蒸餾水或不含目標(biāo)成分的溶劑)調(diào)整儀器至零吸光度,以消除背景干擾的影響。
4. 測量標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光度值:將每個標(biāo)準(zhǔn)溶液及待測樣液分別放入比色皿中,在選定波長下讀取其吸光度值。記錄數(shù)據(jù)時注意保持溫度等條件一致。
5. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),對應(yīng)的吸光度值為縱坐標(biāo)繪制直線或曲線圖即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果樣品的測量結(jié)果落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),則可以通過插值法計算出樣品中目標(biāo)物質(zhì)的實際濃度;若超出范圍則需稀釋后再測。
6. 計算樣品濃度:根據(jù)所得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣液的吸光度值,可以求得未知樣本的具體濃度。如果樣品經(jīng)過了稀釋處理,在最終結(jié)果中還需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)來獲得原始濃度。

通過以上步驟,即可利用分光光度計準(zhǔn)確地測定出溶液中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。在實際操作過程中還需要注意儀器維護(hù)保養(yǎng)、正確選擇比色皿材質(zhì)等因素,確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

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