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什么是工具酶呢?工具酶都有哪些呢?

2020-04-20 18:25 來(lái)源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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什么是工具酶呢?工具酶都有哪些呢?快來(lái)跟著小編了解一下吧!

作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活力的酶稱(chēng)為工具酶。

對(duì)于底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定的酶促反應(yīng),采用酶耦聯(lián)法測(cè)定。

1.NAD(P)十或NAD(P)H偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng)。

2.偶聯(lián)H2O2的工具酶及其指示反應(yīng)

有些酶作用于底物時(shí),可使其氧化產(chǎn)生H2O2,在POD的作用下使色素原氧化顯色進(jìn)行測(cè)定。

(1)使單一的色素原顯色:色素原是一種無(wú)色的色素前身,在過(guò)氧化物酶(POD)存在下被H2O2氧化后可生成有色的色素。如鄰聯(lián)茴香胺(ODA)。

(2)使成對(duì)的色素原顯色:必須有兩個(gè)色素原共同存在,再在過(guò)氧化物酶(POD)的催化下生成色素。如酚和4-氨基安替比林作用,生成紅色色素。

(3)發(fā)光反應(yīng):H2O2也可用化學(xué)發(fā)光反應(yīng)來(lái)監(jiān)測(cè)。

(六)標(biāo)本采集要點(diǎn)及酶活性表示法

1.部分分析前因素對(duì)酶活性測(cè)定的干擾

1)溶血:部分酶在紅細(xì)胞膜或紅細(xì)胞內(nèi)的濃度遠(yuǎn)高于細(xì)胞外,少量紅細(xì)胞的破壞就可能引起血清中酶明顯升高。

2)抗凝劑:有些抗凝劑是金屬螯合劑,可以抑制需要金屬離子的酶。如草酸鹽、檸檬酸鹽和EDTA等可抑制需Ca2+的AMY,也可抑制需Mg2+的CK,草酸鹽可以抑制催化氧化還原的酶,EDTA還能抑制ALP,這些抗凝劑分離的血漿一般不宜做酶活性測(cè)定。肝素可使γ-GT升高,使AMY下降,需加注意。

3)標(biāo)本儲(chǔ)存溫度:

血清白蛋白對(duì)酶蛋白有穩(wěn)定作用,如無(wú)細(xì)菌污染,某些酶(如AST、γ-GT和ALP等)存在于白蛋白中可在室溫保存1~3天,而對(duì)活性影響不大。

有些酶極不穩(wěn)定,如血清前列腺ACP,在37℃放置1小時(shí),活性可下降50%。大部分酶在低溫中可穩(wěn)定較長(zhǎng)時(shí)間,標(biāo)本如在離體后不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)及時(shí)分離血清或血漿并置于冰箱冷藏。

2.標(biāo)本采集要點(diǎn)

酶測(cè)定之前,標(biāo)本要經(jīng)過(guò)采集、分離血清和儲(chǔ)存等過(guò)程,酶在血中是處于動(dòng)態(tài)變化過(guò)程,血液離開(kāi)體內(nèi)后,會(huì)有一定變化。其中任何一個(gè)階段處理不當(dāng),都有可能引起測(cè)定值變化。

(1)不能溶血:因大多數(shù)酶在血細(xì)胞中的含量比在血漿中高得多。如LDH高150倍,ALT高7倍。

(2)及時(shí)分離血細(xì)胞:防止血細(xì)胞內(nèi)酶大量進(jìn)入血清;采血后1~2小時(shí)實(shí)驗(yàn)室必須及時(shí)離心,分離血清。

(3)及時(shí)測(cè)定:防止酶蛋白變性,分離血清如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)放冰箱保存。

(4)盡量用血清標(biāo)本:防止某些抗凝劑對(duì)酶的抑制作用(除非測(cè)定與凝血或纖溶有關(guān)的酶)。

(5)有些標(biāo)本不能冷凍:有的酶在低溫下不穩(wěn)定。

有些酶如LD在融凍時(shí)被破壞,LD在低溫反而不如室溫穩(wěn)定,即所謂的“冷變性”。

3.酶活性表示法

酶活性的大小通常以酶單位數(shù)表示。

酶的國(guó)際單位:在實(shí)驗(yàn)規(guī)定的條件下(溫度、最適pH、最適底物濃度時(shí)),在1分鐘內(nèi)催化1μmol底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量為1個(gè)酶活力國(guó)際單位(U)。

能夠真正代表酶活性大小的是酶促反應(yīng)初速度。

以上是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理的內(nèi)容,希望對(duì)大家有所幫助,更多關(guān)于臨床檢驗(yàn)技師的資訊請(qǐng)大家繼續(xù)關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)! 

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