醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)與大家一起跟著大綱來復(fù)習(xí)!瑞氏染色法染液的配制是檢驗技士考試需要掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理匯總?cè)缦?,希望可以幫助大家?fù)習(xí)掌握。
(1) 瑞氏染液配制:
瑞氏染料 830gm 或 1g
甲醇( AR ) 500ml 或 600ml
先稱干燥(事先放入溫箱干燥過夜)瑞氏染料放置乳缽內(nèi), 用乳棒輕輕 敲碎染料成粉末,再行研磨至聽不到 研芝麻聲 即呈細粉末,加少許甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸內(nèi)顯“一面鏡”光澤,而無染料粉粒沉著,再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮,靜置片刻,將上層液體倒入 一 清潔儲存瓶內(nèi)(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重復(fù)數(shù)次,直至乳缽內(nèi)染料及甲醇用完為止,搖勻,密封瓶口,存室溫暗處,儲存愈久,則染料溶解、分解就越好,一般儲存 3 個月以上為佳。
(2) 緩沖液:
1) 緩沖液作用:染色對氫離子濃度是十分敏感的,據(jù)觀察 pH 值的改變,可使蛋白質(zhì)與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩(wěn)定, PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ,偏堿性染料可與緩沖液中 酸基起 中和作用,偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用,使 pH 恒定。
2) 緩沖液配制( pH6.4~6.8 ,弱酸性):
配方 1 : 配方 2 :
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O( 新鮮 ) 加至 1000ml
置室溫黑暗處,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染則應(yīng)報廢。
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