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霍亂化學(xué)檢驗(yàn)方法介紹:

（一）血液檢查

紅細(xì)胞和血紅蛋白增高，白細(xì)胞計(jì)數(shù)10～20×109/L（1萬(wàn)～2萬(wàn)/mm3）或更高，中性粒細(xì)胞及大單核細(xì)胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽降低，血pH下降，尿素氮增加。治療前由于細(xì)胞內(nèi)鉀離子外移，血清鉀可在正常范圍內(nèi)，當(dāng)酸中毒糾正后，鉀離子移入細(xì)胞內(nèi)而出現(xiàn)低鉀血癥。

（二）尿檢查

少數(shù)病人尿中可有蛋白、紅白細(xì)胞及管型。

（三）病原菌檢查

1.常規(guī)鏡檢

可見粘液和少許紅、白細(xì)胞。

2.涂片染色

取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢，可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。

3.懸滴檢查

將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢，可見運(yùn)動(dòng)活潑呈穿梭狀的弧菌。

4.制動(dòng)試驗(yàn)

取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時(shí)左右的表層生長(zhǎng)物，先作暗視野顯微鏡檢，觀察動(dòng)力。如有穿梭樣運(yùn)動(dòng)物時(shí)，則加入01群多價(jià)血清一滴，若是群霍亂弧菌，由于抗原抗體作用，則凝集成塊，弧菌運(yùn)動(dòng)即停止。如加01群血清后，不能制止運(yùn)動(dòng)，應(yīng)再用0139血清重作試驗(yàn)。

5.增菌培養(yǎng)

所有懷疑霍亂患者糞便，除作顯微鏡檢外，均應(yīng)作增菌培養(yǎng)。糞便留取應(yīng)在使用抗菌藥物之前，且應(yīng)盡快送到實(shí)驗(yàn)室作培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水，36～37℃培養(yǎng)6～8小時(shí)后表面能形成菌膜。此時(shí)應(yīng)進(jìn)一步作分離培養(yǎng)，并進(jìn)行動(dòng)力觀察和制動(dòng)試驗(yàn)，這將有助于提高檢出率和早期診斷。

6.分離培養(yǎng)

常用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基，36～37℃培養(yǎng)8～10小時(shí)霍亂弧菌即可長(zhǎng)成小菌落。后者則需培養(yǎng)10～20小時(shí)。選擇可疑或典型菌落，應(yīng)用霍亂弧菌“0”抗原的抗血清作玻片凝集試驗(yàn)，若陽(yáng)性即可出報(bào)告。近年來(lái)國(guó)外亦有應(yīng)用霍亂毒素基因的DNA探針，作菌落雜交，可迅速鑒定出產(chǎn)毒01群霍亂弧菌。

7.PCR檢測(cè)

新近國(guó)外應(yīng)用PCR技術(shù)來(lái)快速診斷霍亂。其中通過識(shí)別PCR產(chǎn)物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因（TcpA）來(lái)區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來(lái)區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時(shí)內(nèi)可獲結(jié)果，據(jù)稱能檢出每ml堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。

8.鑒別試驗(yàn)

古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑒別。