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公衛(wèi)助理醫(yī)師復習筆記：蛋白質(zhì)理化性質(zhì)之等電點

蛋白質(zhì)的沉淀

概念：蛋白質(zhì)溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。

常用的方法：

1）鹽析：在蛋白質(zhì)溶液中若加大量中性鹽，蛋白質(zhì)膠粒的水化層即被破壞，其所帶電荷也被中和，蛋白質(zhì)膠粒因失去這兩種穩(wěn)定因素而沉淀。此種沉淀過程稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)不發(fā)生變性是其優(yōu)點，缺點是沉淀的蛋白質(zhì)中混有大量中性鹽，必須經(jīng)透析除去。

2）重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì)：重金屬離子如Ag十、Hg2＋、Cu2十、Pb2十等，可與蛋白質(zhì)的負離子結合，形成不溶性蛋白質(zhì)沉淀。沉淀的條件為pH稍大于蛋白質(zhì)的pI為宜。

3）生物堿試劑與某些酸沉淀蛋白質(zhì)：生物堿試劑如苦味酸、鞣酸、鎢酸等以及某些酸，如三氯醋酸、磺酸水楊酸、硝酸等，可與蛋白質(zhì)的正離子結合成不溶性的鹽沉淀。沉淀的條件是pH﹤PI。

4）有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)：可與水混合的有機溶劑，如酒精、甲醇、丙酮等能與蛋白質(zhì)爭水，破壞蛋白質(zhì)膠粒的水化膜，使蛋白質(zhì)沉淀析出。在常溫下，有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。

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